Anticuerpo monoclonal Anti-SLC25A4/ANT1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12235

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de SLC25A4/ANT1

• Identidad proteica e isoformas: SLC25A4 codifica la isoforma de corazón/músculo esquelético de la ADP/ATP translocasa (ANT1), miembro de la familia de transportadores mitocondriales. Otros nombres son: translocador de nucleótidos de adenina 1, proteína transportadora de ADP/ATP 1 y portador de solutos familia 25 miembro 4.
• Función principal como antiportador: Cataliza el intercambio de ATP mitocondrial por ADP citosólico, un paso crítico para el suministro de energía celular. El transportador opera mediante un mecanismo de acceso alterno, ciclando entre estados abiertos al citoplasma y abiertos a la matriz para transportar un sustrato a la vez. Referencias relacionadas: PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• Participación en el poro de transición de permeabilidad mitocondrial (mPTP): Participa en el poro de transición de permeabilidad mitocondrial, un canal inespecífico que permeabiliza la membrana mitocondrial interna y desencadena la muerte celular. Referencias relacionadas: PMID:31883789
• Transportador de protones y termogénesis: Además del intercambio de nucleótidos, ANT1 funciona como transportador de protones, desacoplando la respiración de la síntesis de ATP para generar calor. Esta actividad conductora de protones está regulada por ácidos grasos libres y es inhibida por el intercambio de ADP/ATP, lo que posiciona a ANT1 como un regulador principal del equilibrio de producción de energía.
• Regulación de la mitofagia: Independientemente de su actividad de transporte, ANT1 promueve la mitofagia al interactuar con TIMM44, lo que inhibe la translocasa de presecuencias mitocondriales TIM23 y estabiliza PINK1 en mitocondrias dañadas.
• Localización subcelular: Se localiza exclusivamente en la membrana interna mitocondrial, es una proteína transmembranal de múltiples pasos.
• Modificaciones postraduccionales y palabras clave: La proteína sufre acetilación, fosforilación, metilación y S-nitrosilación. Las anotaciones de UniProtKB destacan su papel en la miocardiopatía, oftalmoplejía externa progresiva y como factor huésped en interacciones virales.
• Especificidad tisular: Se expresa en eritrocitos, así como en el músculo cardíaco y esquelético (como indica el nombre de su isoforma).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético dirigido a la región central (aa 100–200) de SLC25A4 humano. El epítopo se encuentra en una región conservada; la reactividad cruzada a ratón y rata está respaldada por alineación de secuencias. Valide la reactividad con su especie de modelo específica si es crítico para el experimento.
• Para Western blotting, se espera una banda principal de ~33 kDa. Los lisados de control validados por KO (por ejemplo, HeLa o A549) pueden confirmar la especificidad y evitar señales fuera de objetivo.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), el patrón de tinción debe ser citoplasmático con distribución mitocondrial. La recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6,0) puede mejorar la detección. Incluya controles de isotipo adecuados.
• El anticuerpo es adecuado para inmunoprecipitación (IP) y ELISA, por lo que es versátil para estudios de interacción y ensayos cuantitativos. Cuando utilice IP, considere entrecruzar el anticuerpo a las perlas para evitar la coelución de la cadena pesada en ~55 kDa.
• Para ensayos funcionales que alteren la integridad mitocondrial, tenga en cuenta que ANT1 puede influir en la apertura del mPTP; por lo tanto, la tinción puede verse afectada por el estado de estrés celular.

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