Anticuerpo policlonal de conejo anti-SMAD2/SMAD3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796/P84022

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de SMAD2/SMAD3

• SMAD2 es una proteína SMAD regulada por receptores (R-SMAD), también conocida como MADH2, MADR2 y JV18-1, y comparte una alta homología con SMAD3.
• Funciona como transductor intracelular de señales para las quinasas receptoras de tipo 1 de TGF-beta y activina, mediando respuestas transcripcionales.
• Tras la fosforilación, SMAD2 forma un complejo con SMAD4, se transloca al núcleo y se une al elemento TRE para regular la transcripción de genes diana.
• SMAD2 regula positivamente la actividad de la quinasa PDPK1 al estimular su disociación de la proteína YWHAQ de 14-3-3.
• Puede actuar como supresor tumoral en el carcinoma colorrectal. Referencias relacionadas: PMID:8752209
• La localización subcelular es citoplasmática y nuclear, con transporte entre ambos compartimentos en respuesta a la activación de señales.
• Se expresa en gran medida en el músculo esquelético, las células endoteliales, el corazón y la placenta.
• Está sujeto a modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación, la fosforilación y la conjugación con ubiquitina, que regulan su actividad y estabilidad.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de los aminoácidos 150-270 de SMAD2/SMAD3 humano (NP_005893.1); considere realizar una alineación de secuencias para evaluar la reactividad cruzada con otras especies o isoformas.
• Para Western blot, se esperan bandas de aproximadamente 52 kDa (SMAD2) y 48 kDa (SMAD3); las bandas adicionales pueden representar formas de corte y empalme alternativas o proteínas modificadas postraduccionalmente.
• Valide la especificidad del anticuerpo mediante silenciamiento con siRNA, líneas celulares con genes inactivados o tratamiento con fosfatasa para confirmar las señales dependientes de la fosforilación.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P) y la inmunofluorescencia (IF/ICC), se recomienda optimizar la recuperación antigénica y la titulación del anticuerpo para obtener las mejores relaciones señal-ruido.
• El ELISA puede utilizarse para la detección cuantitativa; asegúrese de optimizar los tampones de recubrimiento y las condiciones de incubación adecuadas para el sistema de muestra correspondiente.

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