Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Smad3 (validado mediante KO) para WB, IHC-P y ELISA - P84022

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Smad3

• El miembro 3 de la familia SMAD (Smad3) es un transductor intracelular de señales y modulador transcripcional activado por el TGF-beta (factor de crecimiento transformante) y las quinasas de los receptores de activina de tipo 1.
• Se une al elemento TRE en la región promotora de muchos genes regulados por TGF-beta y, tras formar el complejo SMAD3/SMAD4, activa la transcripción. También puede ensamblarse en un complejo SMAD3/SMAD4/JUN/FOS en el sitio AP-1/SMAD para regular la transcripción mediada por TGF-beta.
• Smad3 regula negativamente la cicatrización de heridas, probablemente al modular tanto el crecimiento como la migración de los queratinocitos primarios y al alterar la quimiotaxis de los monocitos mediada por TGF-beta. Este efecto parece ser sensible a las hormonas.
• Actúa como regulador de la condrogénesis y la osteogénesis e inhibe la cicatrización temprana de las fracturas óseas.
• Smad3 regula positivamente la actividad de la quinasa PDPK1 al estimular su disociación de la proteína YWHAQ, perteneciente a la familia 14-3-3, que actúa como regulador negativo.
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, ADP-ribosilación, fosforilación y ubiquitinación. Contiene dominios de unión a metales y al ADN, y participa en interacciones entre el huésped y los virus.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 100–200 de Smad3 humano (NP_005893.1). Cuando se utilice en especies no humanas, confirme la homología de la secuencia para garantizar la reactividad.
• Para Western blot (WB), utilice controles de carga adecuados y verifique la banda de aproximadamente 48 kDa; se recomienda la validación mediante knockout para confirmar la especificidad en sus muestras.
• Para IHC-P, optimice las condiciones de recuperación antigénica e incluya controles tisulares positivos y negativos para validar los patrones de tinción.
• Para aplicaciones de ELISA, considere combinarlo con un anticuerpo de captura o de detección adecuado para formatos tipo sándwich y confirme el rendimiento utilizando proteína Smad3 recombinante.
• La reactividad cruzada con ratón y rata ha sido validada; no obstante, se recomienda una verificación independiente en su sistema experimental específico.

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