Anticuerpo policlonal de conejo anti-Smad3 para WB, IF/ICC, ELISA - P84022

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Smad3

• Miembro 3 de la familia SMAD (Smad3), también conocido como homólogo MAD 3 o hMAD-3, es un transductor de señales intracelular y modulador transcripcional codificado por el gen SMAD3 (MADH3).
• Como SMAD regulado por receptor (R-SMAD), Smad3 media la señalización de TGF-beta y activina al unirse a las quinasas de receptor de tipo 1.
• Después de la fosforilación, Smad3 forma un complejo con SMAD4, se transloca al núcleo y se une al elemento TRE en las regiones promotoras para regular la transcripción de genes diana.
• También puede interactuar con los factores de transcripción AP-1 JUN/FOS para formar un complejo en los sitios AP-1/SMAD, modulando así la transcripción.
• Smad3 circula entre el citoplasma y el núcleo, y su localización subcelular está influenciada dinámicamente por la actividad de señalización.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, que incluyen fosforilación, acetilación, ADP-ribosilación y ubiquitinación, y contiene un dominio de unión a zinc.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y Smad3 está implicado en procesos como la cicatrización de heridas, condrogénesis, osteogénesis y aneurisma aórtico.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 150–250 de Smad3 humano, una región que se espera que esté expuesta y sea conservada entre humanos, ratones y ratas, lo que favorece la reactividad cruzada.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 48 kDa; valide la detección en lisados celulares relevantes y considere controles adecuados para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización, y use una tinción nuclear de contraste para monitorear la translocación de Smad3 después de la estimulación con TGF-beta.
• Para ELISA, combínelo con un anticuerpo de detección compatible y pruebe diluciones en serie de Smad3 recombinante o muestras nativas para establecer el rango lineal y la sensibilidad.

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