Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Smad5 para WB, IHC-P, ELISA - Q99717

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Smad5

• SMAD5 es un miembro de la familia SMAD, también conocido como JV5-1, Mothers against decapentaplegic homolog 5 (homólogo MAD 5), codificado por el gen SMAD5 (MADH5).
• Tras la estimulación por el ligando BMP, SMAD5 es fosforilado por los receptores BMP de tipo I activados (BMPRI) y forma un complejo con SMAD4. Este complejo se transloca al núcleo y regula la transcripción génica al unirse a los elementos de unión a Smad (SBE) (PubMed:9442019, PubMed:33510867). Referencias relacionadas: PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5 participa en diversos procesos biológicos, entre los que se incluyen el desarrollo embrionario, la diferenciación celular, la angiogénesis y la homeostasis tisular (PubMed:12064918, PubMed:16516194). Referencias relacionadas: PMID:12064918 PMID:16516194
• En su estado no fosforilado, SMAD5 se localiza en el citoplasma y las mitocondrias, donde promueve la respiración mitocondrial y la glucólisis al interactuar con la hexoquinasa 1 (HK1) en respuesta a cambios en el pH citoplasmático (PubMed:28675158). Referencias relacionadas: PMID:28675158
• La localización subcelular incluye el citoplasma, el núcleo y la mitocondria, lo que refleja su doble función en la transducción de señales y el metabolismo energético.
• Se expresa de forma ubicua en diversos tejidos.
• Se modifica postraduccionalmente por fosforilación y acetilación, y contiene dominios de unión a zinc y de unión al ADN esenciales para su función como regulador transcripcional.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para transferencia Western, espera una banda alrededor de los 52 kDa; utiliza controles de carga apropiados y valida con lisados de células positivos y negativos conocidos.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesario realizar la recuperación de antígeno debido a la localización nuclear/citoplasmática; realiza pruebas en secciones de tejido con expresión confirmada de SMAD5.
• El inmunógeno abarca la región C-terminal (aminoácidos 186-465) que incluye el dominio MH2, por lo que el anticuerpo puede reconocer tanto las formas fosforiladas como no fosforiladas; confirma los estados de activación usando anticuerpos específicos para fosfato o tratamientos específicos.
• La reactividad cruzada con ratón y rata indica la presencia de epitopos conservados; cuando lo apliques a otras especies, verifica la homología de secuencia y realiza la validación correspondiente.
• Para ELISA, optimiza las condiciones de recubrimiento y usa SMAD5 recombinante o lisados celulares como controles positivos.

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