Anticuerpo Policlonal Anti-SMPD1 / ASM para WB, IF/ICC, ELISA - P17405

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SMPD1 / ASM

• Codificada por el gen SMPD1, la esfingomielinasa ácida (aSMase) es una fosfodiesterasa de esfingomielina que cataliza la conversión de esfingomielina a ceramida. Referencias relacionadas: PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062

• La enzima existe en dos formas derivadas de un único precursor mediante tráfico alternativo: una dirigida al compartimento endolisosomal y la otra liberada al espacio extracelular; bajo condiciones de estrés, la exocitosis lisosomal se convierte en una fuente principal de la forma secretada. Referencias relacionadas: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211

• Dentro de los lisosomas, la aSMase convierte la esfingomielina en ceramida, desempeñando un papel crítico en la exportación de colesterol desde las membranas intraendolisosomales y exhibiendo actividad de fosfolipasa C hacia la 1,2-diacilglicerolfosfocolina y la 1,2-diacilglicerolfosfoglicerol; también modula la apoptosis inducida por estrés mediante la producción de ceramida. Referencias relacionadas: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683, PMID:8706124

• La forma secretada reorganiza la arquitectura de la membrana plasmática generando ceramida, influyendo así en la señalización celular y la defensa del huésped; su secreción está regulada al alza por mediadores de estrés e inflamación como IL1B, IFNG y TNF. Referencias relacionadas: PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854

• En células dañadas, la forma lisosomal se libera al espacio extracelular de manera dependiente de Ca(2+), promoviendo la endocitosis y la reparación de la membrana plasmática; una forma escindida por CASP7 muestra actividad mejorada, apoyando aún más la reparación de la membrana. Referencias relacionadas: PMID:20530211

• La enzima es subvertida por varios patógenos: infecciones bacterianas (p. ej., P. aeruginosa, N. gonorrhoeae) y virales (p. ej., SARS-CoV, SARS-CoV-2, virus del Ébola de Zaire) desencadenan su secreción, facilitando la entrada del patógeno a través de plataformas de membrana enriquecidas en ceramida.

• Las mutaciones en SMPD1 conducen a la enfermedad de Niemann-Pick tipos A y B, caracterizada por la acumulación de esfingomielina y neurodegeneración; la proteína se localiza en lisosomas, gotas lipídicas y se secreta al espacio extracelular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 70-340, cubriendo una gran parte del dominio catalítico; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca tanto las formas precursoras como maduras de la aSMase.
• Para Western blot, se anticipa una banda alrededor de 70 kDa; sin embargo, la glicosilación y el procesamiento pueden producir múltiples formas, por lo que se recomienda validar en el sistema de muestra relevante.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia e inmunocitoquímica, considere la doble localización de la aSMase (lisosomas y secretada); se recomiendan fijación y permeabilización adecuadas.
• Las aplicaciones de ELISA pueden optimizarse utilizando aSMase recombinante como estándar; la reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata permite estudios multiespecie.

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