Anti-SMPD1 (Validado por KO) Anticuerpo Monoclonal de Conejo para WB, IF-F, IHC-P, ELISA - P17405

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SMPD1

• SMPD1 codifica la esfingomielina fosfodiesterasa, también conocida como esfingomielinasa ácida (aSMase). El splicing alternativo produce isoformas; la proteína existe en dos formas enzimáticas a partir del tráfico alternativo: una endolisosomal y la otra secretada. Referencias relacionadas: PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:9660788
• En los lisosomas, la aSMase convierte la esfingomielina en ceramida, desempeñando un papel crítico en la exportación de colesterol de las membranas intraendolisosomales y exhibiendo actividades de fosfolipasa C. Referencias relacionadas: PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:25339683
• Modula la apoptosis inducida por estrés a través de la producción de ceramida. Referencias relacionadas: PMID:8706124
• La aSMase secretada reorganiza la membrana plasmática convirtiendo la esfingomielina en ceramida, y su secreción se regulan al alza por mediadores inflamatorios y patógenos, facilitando la defensa del huésped y la internalización de patógenos. Referencias relacionadas: PMID:12563314 PMID:17303575 PMID:20807762 PMID:9393854
• Durante la infección bacteriana, la forma lisosomal se libera extracelularmente y es escindida por CASP7, promoviendo la reparación de la membrana plasmática y contrarrestando los poros de perforina GSDMD. Referencias relacionadas: PMID:21157428
• La localización subcelular incluye lisosomas, gotas de lípidos y secreción al espacio extracelular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, fosforilación y formación de enlaces disulfuro; la enzima depende del zinc (unión a metales).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se genera contra un fragmento recombinante que abarca los aminoácidos 70-340 del SMPD1 humano, que puede reconocer epítopos dentro del dominio catalítico. Considere validar la especificidad usando lisados celulares knockout (KO) cuando estén disponibles.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), use condiciones reductoras y espere una banda a aproximadamente 70 kDa. El enriquecimiento lisosomal o el tratamiento con inductores de estrés pueden mejorar la detección.
• En inmunofluorescencia (IF-F) e inmunohistoquímica (IHC-P), se recomiendan la permeabilización y la recuperación de antígenos. La tinción simultánea con marcadores lisosomales puede confirmar la localización subcelular.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como parte de un par emparejado; titule y optimice las condiciones para su formato de ensayo específico.
• Se informa reactividad cruzada para humano y rata; para otras especies, se aconseja la validación.

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