Anticuerpo policlonal de conejo anti-SMPD3 para WB y ELISA - Q9NY59

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de SMPD3

• SMPD3 codifica la esfingomielinasa neutra 2 (nSMase2), que hidroliza la esfingomielina para generar la ceramida lipídica bioactiva y fosfocolina.
• La ceramida producida por SMPD3 media la apoptosis celular y la detención del crecimiento, y la enzima puede regular estos dos procesos de forma independiente.
• SMPD3 actúa como supresor del crecimiento en células confluentes, regulando así el ciclo celular.
• SMPD3 desempeña un papel fundamental en el desarrollo posnatal, contribuyendo a la mineralización de los huesos y la dentina. Referencias relacionadas: PMID:10823942 PMID:14741383 PMID:15051724
• SMPD3 también hidroliza la esfingosilfosfocolina y se une a fosfolípidos aniónicos como la fosfatidilserina y el ácido fosfatídico, que modulan su actividad y localización subcelular.
• A nivel subcelular, SMPD3 se localiza en la membrana del aparato de Golgi y en la membrana celular.
• SMPD3 experimenta un corte y empalme alternativo que produce múltiples variantes de transcritos.
• Expresada predominantemente en el cerebro, SMPD3 puede estar implicada en la activación de JNK inducida por IL-1β en hepatocitos y en la regulación de NOS2/iNOS mediada por NF-κB en condiciones inflamatorias (por similitud).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región C-terminal (aa 416-655), lo que puede conferir especificidad de isoforma; valide la especificidad del anticuerpo mediante bloqueo con péptidos o controles de silenciamiento para su sistema diana.
• Para Western blot, la banda esperada se encuentra aproximadamente a 71 kDa. Optimice la carga de proteínas y las condiciones de bloqueo, y utilice lisados de tejido cerebral humano, de ratón o de rata como controles positivos, dada la elevada expresión en el cerebro.
• En aplicaciones de ELISA, realice diluciones seriadas del anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima; incluya proteína SMPD3 recombinante como control positivo.
• La palmitoilación de SMPD3 (según lo indicado por UniProt) puede influir en la migración o en la unión del anticuerpo; deben mantenerse condiciones desnaturalizantes y reductoras durante la preparación de las muestras.
• Se ha informado de reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, verifique los patrones de tinción utilizando modelos de eliminación génica o de sobreexpresión para garantizar la especificidad.

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