Anticuerpo monoclonal anti-Sonic Hedgehog (Shh) para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q15465

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Sonic Hedgehog (Shh)

• Sonic hedgehog (SHH) se sintetiza como una proteína precursora que sufre una escisión autoproteolítica y una modificación por colesterol para generar el dominio de señalización N-terminal activo (ShhN) y un fragmento C-terminal (ShhC). Referencias relacionadas: PMID:29954986, PMID:29995851, PMID:30139912
• El morfógeno ShhN doblemente lipidado se une al receptor Patched (PTCH1/PTCH2), eliminando la inhibición de Smoothened (SMO) y activando la transcripción de genes diana aguas abajo. Referencias relacionadas: PMID:10753901, PMID:24522195, PMID:24863049, PMID:29995851, PMID:31548691
• SHH se localiza en el retículo endoplásmico y la membrana del Golgi durante el procesamiento; el ShhN maduro secretado puede asociarse a la membrana celular.
• SHH cumple funciones críticas en el desarrollo embrionario, incluyendo la organización del sistema nervioso central, la especificación del eje de la yema de la extremidad y la guía de axones.
• La proteína contiene un dominio de proteasa unido a zinc y presenta actividades de hidrolasa y transferasa, lo que refleja sus funciones de escisión autocatalítica y transferencia de colesterol.
• Las mutaciones en SHH están asociadas a trastornos del desarrollo como la holoprosencefalia y la microftalmia.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 200-300 del SHH humano; esta región puede estar conservada entre especies, lo que coincide con la reacción cruzada observada.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho de la proteína de longitud completa es 50 kDa, pero las formas procesadas pueden aparecer en pesos moleculares menores; valide con controles adecuados.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia (IF/ICC, IF-P), optimice las condiciones de fijación y permeabilización para el tipo específico de célula o tejido, y confirme los patrones de localización con respecto a los datos publicados.
• Para ELISA, considere el uso de anticuerpos pareados o estándares de proteína recombinante para establecer la sensibilidad del ensayo.

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