Anticuerpo monoclonal anti-Sorting Nexin-5 (SNX5) para IHC-P y ELISA - Q9Y5X3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SNX5

• La nexina de clasificación 5 (SNX5) es un componente del subcomplejo SNX-BAR, que deforma la membrana del retromero y media el transporte retrógrado de carga desde los endosomas hasta la red trans-Golgi (TGN). SNX5 interactúa con membranas que contienen fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns(3P)) o fosfatidilinositol 3,4-bisfosfato (PtdIns(3,4)P2). Referencias relacionadas: PMID:15561769
• SNX5 participa en el transporte retrógrado del receptor de enzimas lisosomales IGF2R, facilitando su reciclaje y contribuyendo a la función lisosomal. Referencias relacionadas: PMID:17148574 PMID:18596235
• SNX5 desempeña un papel en la internalización del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) tras la estimulación con EGF, y participa en la clasificación endosomal y la degradación de EGFR a través de un mecanismo independiente del retromero que involucra la isoforma 3 de PIP5K1C. Referencias relacionadas: PMID:23602387
• Regula la clasificación y degradación de E-cadherina al inhibir la degradación mediada por la isoforma 3 de PIP5K1C, afectando así la dinámica de adhesión celular. Referencias relacionadas: PMID:24610942
• SNX5 también está implicada en la macropinocitosis, un proceso esencial para la captura no selectiva de fase fluida y el tráfico de membranas. Referencias relacionadas: PMID:18854019 PMID:21048941
• Subcelularmente, SNX5 se localiza en las membranas de los endosomas tempranos, vesículas citoplasmáticas, la membrana celular y proyecciones celulares como las copas fagocíticas y los pliegues, lo que subraya su papel en la remodelación dinámica de la membrana.
• La proteína contiene un dominio de homología Phox (PX) que se une a fosfoinositidos y un dominio BAR para detectar la curvatura de la membrana. Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, y se ha implicado en interacciones huésped-virus.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó usando una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 28–127 de la SNX5 humana, que corresponde a una región potencialmente expuesta y adecuada para generar anticuerpos con especificidad por la porción N-terminal de la proteína.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda usar secciones de tejido fijadas con formalina e incluidas en parafina con una recuperación de antígeno adecuada. Comience con un rango de dilución recomendado basado en los niveles de expresión endógena y valide con tejidos de control positivo y negativo.
• La reactividad del anticuerpo en ELISA sugiere que reconoce bien el inmunógeno; al realizar el ensayo, incluya SNX5 recombinante purificado como control positivo y sueros preinmunes como control negativo.
• Aunque se confirma la reactividad cruzada para ratón y rata, es recomendable validar el anticuerpo en su sistema modelo específico, especialmente si usa métodos de detección distintos a IHC-P y ELISA (por ejemplo, el Western blot no figura como aplicación validada, por lo que se necesita una verificación adicional).
• Para estudios que involucren tráfico endosomal o ensayos de degradación, el anticuerpo puede ser útil para inmunofluorescencia o coinmunoprecipitación, pero estos usos deben validarse empíricamente.

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