Anticuerpo policlonal anti-SPHK1 para IHC-P, ELISA - Q9NYA1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de SPHK1

• SPHK1, también conocida como SPHK, es una esfingosina cinasa que cataliza la fosforilación de la esfingosina para formar esfingosina 1-fosfato (S1P), un mediador lipídico clave con funciones intra y extracelulares (PubMed:11923095, PubMed:20577214, PubMed:23602659). Referencias relacionadas: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• A diferencia de SPHK2, que es proapoptótica, SPHK1 promueve el crecimiento celular e inhibe la apoptosis, y también participa en el tráfico de membranas endocíticas y la maduración de los endosomas independientemente de su actividad cinasa (PubMed:16118219, PubMed:24929359, PubMed:28049734). Referencias relacionadas: PMID:16118219, PMID:24929359, PMID:28049734
• A través de S1P, SPHK1 estimula la actividad de la ligasa E3 de ubiquitina TRAF2 y promueve la activación de NF-kappa-B en respuesta a la señalización de TNF, lo que conduce a la secreción de IL-17; también regula negativamente la inducción de RANTES mediante la vía de p38 MAPK (PubMed:20577214, PubMed:23935096). Referencias relacionadas: PMID:20577214, PMID:23935096
• Además, SPHK1 presenta actividad de acetiltransferasa de serina sobre PTGS2/COX2, la cual se ve potenciada por la esfingosina, y promueve la secreción neuronal de mediadores especializados promotores de la resolución durante la neuroinflamación.
• A nivel subcelular, SPHK1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular, la membrana endosómica, las fositas recubiertas de clatrina y la sinapsis.
• SPHK1 se expresa ampliamente, con los niveles más altos en el hígado, los riñones, el corazón y el músculo esquelético adultos, y también se detecta a nivel proteico en la corteza cerebral.
• Las palabras clave destacan sus funciones en el metabolismo lipídico, la unión a la calmodulina, la fosforilación y el corte y empalme alternativo.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 201-300 de SPHK1 humana (NP_001136074.1). Los anticuerpos policlonales generados contra esta región pueden reconocer múltiples isoformas o formas modificadas postraduccionalmente; los investigadores deben verificar la especificidad en su contexto experimental.
• Para IHC-P, considere utilizar tejidos con una expresión elevada de SPHK1 (por ejemplo, hígado o riñón) como controles positivos y optimice empíricamente la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo.
• En ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para detectar SPHK1 en lisados celulares o preparaciones de proteínas recombinantes; deben determinarse las condiciones adecuadas de bloqueo y lavado.
• Se ha informado de reactividad cruzada con ratón y rata, pero debe comprobarse la homología de secuencia de la región del inmunógeno en estas especies para confirmar el reconocimiento esperado.
• Como anticuerpo policlonal, puede ser adecuado para detectar SPHK1 desnaturalizada o nativa, pero las condiciones de Western blot desnaturalizante pueden no ser óptimas dadas las limitaciones de aplicación; si se intentan otras aplicaciones, se requiere validación.

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