Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-SPHK1 para WB y ELISA - Q9NYA1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SPHK1

• SPHK1 (esfingosina quinasa 1), también conocida como SK1 y acetiltransferasa SPHK1, es una enzima multifuncional codificada por el gen SPHK1 (ID de gen: 8877) en humanos. Pertenece a la familia de las esfingosina quinasas y desempeña papeles clave en el metabolismo y la señalización de los esfingolípidos.
• Cataliza la fosforilación de la esfingosina para formar esfingosina 1-fosfato (S1P), un mediador lipídico bioactivo con funciones intracelulares y extracelulares. Actúa específicamente sobre la D-eritro-esfingosina y la esfinganina, pero no sobre otros lípidos. Referencias relacionadas: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• A diferencia de SPHK2, que tiene efecto proapoptótico, regula negativamente los niveles intracelulares de ceramida, aumenta el crecimiento celular e inhibe la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:16118219
• Mediador de la señalización de TNF: a través de S1P, estimula la actividad de la ubiquitina ligasa E3 TRAF2 y promueve la activación de NF-kappa-B, lo que conduce a la secreción de IL-17. También regula negativamente la inducción de RANTES a través de la vía MAPK p38 en respuesta a TNF. Referencias relacionadas: PMID:20577214, PMID:23935096
• Presenta actividad de serina acetiltransferasa sobre PTGS2/COX2 de manera dependiente de acetil-CoA, lo que influye en la secreción neuronal de mediadores preresolutivos especializados (SPM) como la 15-R-lipoxina A4 durante la neuroinflamación.
• Se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular, la membrana de endosomas, las fosas recubiertas de clatrina y las sinapsis, lo que refleja sus diversas funciones en la señalización y el tráfico de membranas.
• Se expresa ampliamente, con los niveles más altos en el hígado adulto, riñón, corazón, músculo esquelético y corteza cerebral. Referencias relacionadas: PMID:29662056
• Contiene dominios de unión a ATP y a calmodulina; está regulado por fosforilación y corte alternativo (palabras clave UniProt: Quinasa, Transferasa, Fosfoproteína, Corte alternativo).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó contra la región N-terminal (aa 1-160) de la SPHK1 humana (NP_001136074.1). Esta región es común a múltiples isoformas y puede proporcionar una detección amplia; verifique la alineación de secuencia para necesidades específicas de isoforma.
• Para Western blot, se espera una banda cerca de 43 kDa, pero las modificaciones postraduccionales o el corte alternativo pueden provocar desplazamientos de banda. Optimice los controles de carga y la dilución del anticuerpo usando lisados positivos y negativos relevantes.
• Para ELISA, considere emparejarlo con anticuerpos de captura/detección validados para SPHK1. Valide la especificidad del ensayo usando proteína recombinante y controles negativos adecuados.
• Utilice lisados de tejidos o células con expresión conocida de SPHK1 (por ejemplo, hígado, riñón o corteza cerebral) como controles positivos, e incluya un control negativo (por ejemplo, knockdown de SPHK1 o tejido con baja expresión).

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