Anticuerpo monoclonal anti-glicoproteína de espiga para WB, IF/ICC, ELISA - P0DTC2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la glicoproteína de espiga

• La glicoproteína de espiga (S) es una proteína de fusión viral de clase I responsable de mediar la entrada del SARS-CoV-2 en las células huésped.
• La proteína S se une a la célula huésped al interactuar con el receptor de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2), iniciando la infección (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• La escisión proteolítica en el sitio S2/S2' por las proteasas del huésped TMPRSS2 o catepsina L desencadena cambios conformacionales irreversibles, lo que lleva a la fusión de las membranas viral y celular (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Los receptores de entrada alternativos del huésped incluyen neuropilina-1/2 (NRP1/NRP2) y el receptor de asialoglicoproteína 1 (ASGR1), lo que puede explicar el tropismo por las células epiteliales olfativas y las vías independientes de ACE2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293, PubMed:34837059). Referencias relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:34837059
• La proteína contiene regiones de bobina enrollada, enlaces disulfuro y está altamente glicosilada, lo que es consistente con su papel como glicoproteína de fusión de la envoltura viral.
• La localización subcelular incluye la membrana del virión, el compartimento intermedio del retículo endoplásmico-Golgi del huésped y la membrana celular del huésped.
• Contribuye a la evasión inmunitaria viral al inhibir las respuestas inmunitarias innatas del huésped y contrarrestar la restricción de la tetherina (BST-2).
• El dominio del tallo de S contiene tres bisagras, lo que proporciona una libertad orientacional inesperada al dominio de la cabeza, lo que probablemente ayuda a la unión del receptor (PubMed:32817270). Referencias relacionadas: PMID:32817270

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se generó contra un fragmento recombinante de la proteína 3CLpro; la posible reactividad cruzada con la glicoproteína de espiga (P0DTC2) debe validarse en su contexto de ensayo específico.
• Para Western blot (WB), se espera una banda cerca de 141 kDa en condiciones reductoras; optimice la preparación de la muestra y la dilución del anticuerpo para minimizar la unión inespecífica.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), considere usar fijación con paraformaldehído al 4% y permeabilización con Tritón X-100 al 0.1%; incluya controles apropiados para confirmar la especificidad de la tinción.
• Para aplicaciones de ELISA, titule tanto el anticuerpo como el antígeno para lograr una relación señal/ruido robusta; puede ser necesario evaluar la reactividad cruzada con otras proteínas de coronavirus.

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