Anticuerpo policlonal Anti-SPIN1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y657

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SPIN1

• Codificado por el gen SPIN1, Spindlina-1 es una proteína lectora de cromatina también conocida como proteína relacionada con cáncer de ovario, que pertenece a la familia SPIN.
• Reconoce y se une específicamente a la histona H3 trimetilada tanto en Lis-4 como en Lis-9 (H3K4me3K9me3), cumpliendo un papel fundamental en el silenciamiento de retrotransposones mediado por piRNA durante la espermatogénesis. Referencias relacionadas: PMID:33574238
• Iniciador clave de la vía PIWIL4-piRNA en células germinales embrionarias masculinas, que promueve la metilación del ADN y el silenciamiento de transposones LINE1 jóvenes mediante el reclutamiento de PIWIL4 y SPOCD1.
• También reconoce H3K4me3 y H3R8me2a, actuando como activador de la vía de señalización Wnt aguas abajo de PRMT2. Referencias relacionadas: PMID:22258766, PMID:29061846
• En cáncer, promueve la proliferación celular mediante la activación de la señalización Wnt; su sobreexpresión induce detención en metafase e inestabilidad cromosómica. Referencias relacionadas: PMID:24589551
• Se localiza en el núcleo y el nucléolo, donde se asocia con loci de ADNr activos y promueve la expresión de genes de ARNr. Referencias relacionadas: PMID:21960006
• Puede participar en la regulación del ciclo celular durante la transición de gameto a embrión y en la reanudación de la meiosis ovocitaria.
• Se expresa altamente en tejidos de cáncer de ovario; sufre modificaciones postraduccionales por acetilación, fosforilación y formación de enlaces isopépticos, con funciones funcionales en la meiosis y la regulación de la cromatina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante que cubre los aminoácidos 1–262 de SPIN1 humana, lo que sugiere que reconoce la proteína de longitud completa; hay que tener en cuenta que puede detectar conformaciones nativas.
• Para Western blot, se espera una banda cerca de los 30 kDa; valide el ensayo con controles de carga apropiados y confirme el tamaño de la banda en su sistema de muestra.
• Para IHC-P, las condiciones de recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epitopos inducida por calor a pH 6 o 9) deben optimizarse según el tipo de tejido y el método de fijación.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; realice titulaciones en tablero para determinar las diluciones óptimas.
• La reactividad cruzada con ratón y rata indica que los epitopos están conservados; valide la reactividad en lisados de tejido o células de la especie correspondiente.
• Debido a la localización nuclear de SPIN1, asegure una extracción eficiente de proteínas nucleares para Western blot o una permeabilización apropiada para inmunotinción.
• Las múltiples modificaciones postraduccionales (acetilación, fosforilación, similares a la ubiquitinación) pueden afectar la unión del anticuerpo; considere el tratamiento con fosfatasa o desacetilasa si se observan desplazamientos de banda.

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