Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-SQSTM1 para WB, ELISA - Q64337

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SQSTM1

• SQSTM1, también conocido como sequestosome-1 o p62, es una proteína adaptadora citoplasmática inducible por estrés que sirve como receptor de autofagia selectiva al vincular agregados de proteínas ubiquitinadas a la maquinaria autofágica.
• Reconocimiento de carga autofágica: Como receptor de autofagia selectiva, SQSTM1 actúa como puente entre la carga ubiquitinada y los autofagosomas. Sufre separación de fase líquido-líquido al unirse a proteínas ubiquitinadas a través de su dominio UBA, formando cuerpos p62 que luego son reclutados a los autofagosomas mediante la interacción de su motivo LIR con las proteínas de la familia ATG8, lo que conduce a la degradación autofágica de la carga. Referencias relacionadas: PMID:25723488, PMID:33397898
• Señalización citoprotectora: SQSTM1 interactúa con KEAP1, secuestrándolo en cuerpos de inclusión y evitando así la degradación mediada por KEAP1 de NFE2L2/NRF2. Esto conduce a la acumulación nuclear de NRF2 y la expresión de genes antioxidantes y citoprotectores. Referencias relacionadas: PMID:20173742, PMID:20421418, PMID:24011591
• Regulación de la vía NF-kappa-B: SQSTM1 actúa como un adaptador que media la interacción entre TRAF6 y CYLD, influyendo así en la activación de NF-kappa-B en respuesta a citoquinas como TNF, NGF e interleucina-1. Referencias relacionadas: PMID:14960283, PMID:18382763
• Localización subcelular: SQSTM1 se localiza en agregados citoplasmáticos (cuerpos p62), autofagosomas, endosomas tardíos, lisosomas y el núcleo (cuerpos PML). También se encuentra en el retículo endoplásmico y los sarcómeros de las miofibrillas, reflejando sus diversas funciones en el control de calidad de las proteínas y la señalización.
• Modificaciones postraduccionales y características estructurales: La proteína está sujeta a acetilación, fosforilación, ubiquitinación y palmitoilación, y contiene dominios de dedo de zinc. Estas modificaciones regulan su actividad, localización y estabilidad.
• Distribución tisular: SQSTM1 se expresa ampliamente en los tejidos, lo que es coherente con sus roles fundamentales en la homeostasis celular y las respuestas al estrés.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 250-350 del SQSTM1 de ratón, una región que puede incluir partes del dominio PB1 y secuencias enlazadoras. La naturaleza policlonal de este anticuerpo puede reconocer múltiples epítopos, proporcionando una señal robusta en el Western blot (WB).
• Para WB, se espera una banda cercana a 48 kDa, pero debido a la tendencia de SQSTM1 a formar agregados y sufrir modificaciones postraduccionales, también pueden aparecer especies de mayor peso molecular. Para minimizar la agregación, caliente las muestras en un tampón de carga reductor antes de la electroforesis.
• Para ELISA, considere el uso de la proteína recombinante SQSTM1 o el péptido inmunizante como antígeno de recubrimiento. Se recomienda la titulación tanto del anticuerpo como del antígeno para obtener una relación óptima señal/ruido.
• La reactividad cruzada con humano, ratón y rata está respaldada por la homología de secuencia; sin embargo, se sugiere la validación individual en la muestra y la aplicación específicas.

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