Anticuerpo monoclonal anti-SRSF1/SF2/ASF para WB, IHC-P y ELISA - Q07955

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de SRSF1

• SRSF1 (factor de splicing 1 rico en serina/arginina), también conocido como ASF-1, SF2 o SFRS1, es un miembro de la familia de proteínas SR que desempeña funciones esenciales en el splicing constitutivo y alternativo del pre-ARNm. Dos isoformas más cortas, ASF-2 y ASF-3, actúan como represores del splicing.
• Previene la omisión de exones y garantiza la precisión del splicing al formar un puente entre U1 snRNP y U2AF, promoviendo el reconocimiento de los sitios de splicing. SRSF1 estimula la unión de U1 snRNP a los sitios de splicing 5’ e interactúa con otros componentes del espliceosoma mediante su dominio RS.
• SRSF1 se une a secuencias de ARN ricas en purinas, incluido el octámero 5’-RGAAGAAC-3’ y los decámeros AGGACAGAGC/AGGACGAAGC. Se une preferentemente al motivo 5’-CGAGGCG-3’ in vitro. Tres copias del octámero constituyen el potenciador del splicing ASF/SF2 (ASE), que activa específicamente el splicing dependiente de ASE.
• Además del splicing, SRSF1 puede funcionar como adaptador de exportación del ARNm, facilitando la exportación nuclear mediante la vía TAP/NXF1.
• A nivel subcelular, SRSF1 se localiza en los speckles nucleares, el citoplasma y los cromosomas, lo que refleja sus funciones dinámicas en el procesamiento y transporte del ARN.
• La proteína está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su actividad y localización.
• Las variantes genéticas de SRSF1 se han asociado con discapacidad intelectual, lo que destaca su importancia en el neurodesarrollo.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, el peso molecular previsto de SRSF1 es de aproximadamente 28 kDa, pero las modificaciones postraduccionales pueden provocar desplazamientos de banda o múltiples bandas. Valide la detección en lisados de células o tejidos pertinentes.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda optimizar los pasos de recuperación antigénica y bloqueo. Puede esperarse un patrón de tinción nuclear moteado; valide con controles positivos y negativos adecuados.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; tenga en cuenta que se generó contra un inmunógeno peptídico (aa 100-200), por lo que probablemente reconoce un epítopo lineal. Realice evaluaciones de reactividad cruzada y del efecto de matriz con tipos de muestra pertinentes.
• La reactividad cruzada con SRSF1 de ratón y de rata permite realizar estudios multiespecie, pero confirme siempre la especificidad en el sistema experimental.
• Al tratarse de un anticuerpo monoclonal, se espera una consistencia entre lotes, pero cada lote nuevo debe verificarse en la aplicación prevista.

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