Anticuerpo monoclonal Anti-SUPT5H/SPT5 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00267

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SUPT5H/SPT5

• SPT5 (SUPT5H) es la subunidad mayor del complejo factor inductor de sensibilidad a DRB (DSIF), que regula el procesamiento de ARNm y la elongación transcripcional por la ARN polimerasa II.
  Referencias relacionadas: PMID:10075709, PMID:10199401, PMID:10421630

• DSIF regula positivamente la capadura del ARNm al estimular la actividad guanililtransferasa de ARNm de RNGTT/CAP1A.
  Referencias relacionadas: PMID:10075709, PMID:10421630, PMID:10757782

• DSIF coopera con el complejo factor de elongación negativo (NELF) para potenciar la pausa transcripcional en sitios proximales al promotor, facilitando el ensamblaje de un complejo de ARN polimerasa II competente para la elongación.
  Referencias relacionadas: PMID:10075709, PMID:10199401, PMID:10757782

• DSIF y NELF promueven la pausa al inhibir el factor de elongación transcripcional TFIIS/S-II, que estimula la actividad nucleasa intrínseca de la ARN polimerasa para escindir los transcriptos bloqueados, favoreciendo la reanudación de la transcripción.
  Referencias relacionadas: PMID:16214896

• Después de la fosforilación por CDK9, DSIF puede convertirse en un factor de elongación positivo, permitiendo una elongación transcripcional productiva.
  Referencias relacionadas: PMID:16427012

• SPT5 es esencial para la activación transcripcional mediada por Tat del VIH-1, suprimiendo las pausas y previniendo la terminación prematura de los transcriptos virales.
  Referencias relacionadas: PMID:10393184, PMID:10454543, PMID:11809800, PMID:11112772, PMID:14701750

• SPT5 se localiza predominantemente en el núcleo y se expresa de forma ubicua en todos los tejidos.

• SPT5 sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, lo que refleja su regulación dinámica en la transcripción.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó a partir de un péptido sintético contenido entre los aminoácidos 800–900 del SPT5 humano (región C-terminal). Esta región probablemente se conserva entre humano, ratón y rata, lo que coincide con la reactividad cruzada reportada.
• Para transferencia Western (WB), el SPT5 endógeno se detecta alrededor de 121 kDa. Se recomienda usar lisados enriquecidos en fracción nuclear para mejorar la señal, dada su localización nuclear.
• En ensayos de inmunoprecipitación (IP), el rendimiento del anticuerpo puede depender de la accesibilidad del epitopo; es necesario validarlo en el sistema de muestra correspondiente.
• Para inmunocitoquímica (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), se espera una tinción nuclear. Para obtener resultados óptimos, puede ser necesario realizar procedimientos adecuados de permeabilización y recuperación de antígenos.
• Para aplicaciones de ELISA, se recomienda aparearlo con anticuerpos de captura/detección dirigidos contra epitopos no solapantes para garantizar la especificidad.
• Realice una titulación del anticuerpo en las condiciones específicas de su ensayo, ya que las concentraciones de trabajo óptimas pueden variar según el tipo de muestra y el método de detección.

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