Anticuerpo Monoclonal Anti-TDP-43/TARDBP para WB, IP, IF, IHC, ChIP - Q13148

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de TDP-43

• La proteína de unión al ADN TAR de 43 kDa (TDP-43) está codificada por el gen TARDBP y también se conoce como ALS10. Pertenece a la familia hnRNP y contiene dos motivos de reconocimiento de ARN (RRM) y un dominio C-terminal rico en glicina.
• Actúa como proteína de unión al ARN participando en múltiples pasos de la biogénesis y el procesamiento del ARN (PubMed:23519609). Referencias relacionadas: PMID:23519609
• Se une preferentemente a repeticiones GU a través de sus RRM, localizándose en intrones largos y en las regiones 3'UTR de los ARNm, regulando así el empalme de muchos ARN, incluidos los críticos para la supervivencia neuronal y la neurodegeneración (PubMed:23519609, PubMed:24240615, PubMed:24464995, PubMed:21358640, PubMed:29438978). Referencias relacionadas: PMID:23519609, PMID:24240615, PMID:24464995, PMID:21358640, PMID:29438978
• Desempeña un papel en el mantenimiento de la homeostasis mitocondrial al procesar los transcritos mitocondriales (PubMed:28794432) y regula la estabilidad del ARNm al reclutar desadenilasas en la región 3'UTR (PubMed:30520513). Referencias relacionadas: PMID:28794432, PMID:30520513
• En respuesta al estrés oxidativo, se asocia con gránulos de estrés y ribosomas paralizados para promover la supervivencia celular (PubMed:19765185, PubMed:23398327). Referencias relacionadas: PMID:19765185, PMID:23398327
• Se localiza en el núcleo, citoplasma, gránulos de estrés y mitocondrias. Se expresa de forma ubicua, con niveles especialmente altos en páncreas, placenta, pulmón, tracto genital y bazo.
• Sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su función y su tendencia a la agregación. Las mutaciones y la deslocalización están vinculadas a la esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y la degeneración lobar frontotemporal (DLFT).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se dirige a la región C-terminal (aa 300–400) de TDP-43 humano, por lo que puede reconocer tanto la forma completa como las formas clivadas; tenga esto en cuenta al interpretar los patrones de bandas en Western blot.
• Para Western blot, se espera una banda predominante cerca de los 45 kDa; utilice controles positivos adecuados como lisados de células HeLa o de tejido cerebral y valide el resultado en su sistema de muestra.
• La reactividad cruzada con ratón y rata ya ha sido documentada; confirme el rendimiento en sus condiciones experimentales, especialmente para inmunohistoquímica, donde la fijación y la recuperación de antígeno pueden afectar la tinción.
• En inmunohistoquímica (IHC), optimice la recuperación de antígeno (por ejemplo, buffer de citrato pH 6,0 o EDTA pH 9,0) y las condiciones de detección para cada tipo de tejido.
• Para inmunoprecipitación (IP) e inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), verifique la idoneidad del anticuerpo para la unión a proteínas nativas; tenga en cuenta que TDP-43 es principalmente una proteína de unión al ARN, y las interacciones con el ADN pueden requerir una optimización del entrecruzamiento.
• Este anticuerpo se ha utilizado en ELISA; sin embargo, las condiciones individuales del ensayo (por ejemplo, buffer de recubrimiento, agente de bloqueo) deben optimizarse para alcanzar la sensibilidad deseada.

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