Anticuerpo monoclonal anti-TERT para WB y ELISA - O14746

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la TERT

• La transcriptasa inversa de la telomerasa (TERT) es la subunidad catalítica del complejo ribonucleoproteico de la telomerasa, esencial para la adición de novo de repeticiones teloméricas en los extremos de los cromosomas.
• La enzima alterna entre la unión al cebador, la adición de nucleótidos, la translocación y la liberación, añadiendo la repetición hexamérica 5’-TTAGGG-3’; es principalmente activa en células madre, células germinales y la mayoría de los cánceres, mientras que permanece silenciada en la mayoría de los tejidos somáticos normales.
• Además de alargar los telómeros, la TERT modula la señalización de Wnt e influye en el envejecimiento celular y las vías antiapoptóticas.
• Surgen múltiples isoformas por corte y empalme alternativo; la proteína de longitud completa es predominantemente nuclear y se localiza en los nucléolos, el nucleoplasma y los telómeros, aunque también se detecta en cuerpos PML citoplasmáticos.
• La expresión de TERT es específica de cada tejido: alcanza sus niveles más altos en subpoblaciones de timocitos, niveles intermedios en los linfocitos T de las amígdalas y niveles bajos o indetectables en las células T de la sangre periférica.
• La proteína está sujeta a fosforilación y funciona como una nucleotidiltransferasa dependiente de metales y de unión al ADN, que requiere magnesio para la catálisis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 1000–1132) de la TERT humana, que está bien conservada entre humanos, ratones y ratas, lo que respalda la reactividad cruzada observada.
• Para Western blot, se espera una banda cercana a 127 kDa; las bandas adicionales de menor peso pueden indicar variantes de corte y empalme o degradación. Incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, células HeLa y lisado de testículo de ratón) y valide el rendimiento en sus condiciones experimentales.
• En ELISA, considere utilizar proteína TERT recombinante o el inmunógeno como antígeno de recubrimiento; tanto los formatos indirectos como los de tipo sándwich pueden ser adecuados.
• Dado que la expresión de TERT suele ser baja, el enriquecimiento (por ejemplo, mediante extractos nucleares) o la amplificación de la señal pueden mejorar la sensibilidad de detección.
• Aunque se indica reactividad cruzada con ratón y rata, confirme siempre el rendimiento en su sistema de muestras específico mediante el análisis de controles positivos y negativos adecuados.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

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