Anticuerpo policlonal de conejo anti-TFAM para WB, IF/ICC, ELISA - Q00059

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TFAM

• TFAM (factor de transcripción A, mitocondrial), también conocido como MtTF1, TCF-6 y TCF6L2, es un factor de transcripción mitocondrial clave codificado por el núcleo que regula la expresión génica mitocondrial.
• Forma el complejo de iniciación de la transcripción mitocondrial con TFB2M y POLRMT, esencial para la transcripción basal del ADN mitocondrial (mtDNA).
  Referencias relacionadas: PMID:29149603
• TFAM se une a los promotores de la hebra ligera y HSP1, doblando el ADN en forma de U mediante sus dominios HMG-box para reclutar POLRMT y facilitar el inicio de la transcripción.
  Referencias relacionadas: PMID:22037172, PMID:1737790
• Además de la transcripción, TFAM es fundamental para el mantenimiento y empaquetamiento del mtDNA; compacta el mtDNA en nucleoides y su dosis regula estrechamente el número de copias de mtDNA.
  Referencias relacionadas: PMID:19304746, PMID:22841477, PMID:22037171
• En cooperación con TFB2M, TFAM permite la apertura del promotor y la captura de la hebra no molde del ADN, un paso crucial para una transcripción precisa.
  Referencias relacionadas: PMID:20410300
• TFAM se localiza en la matriz mitocondrial y en los nucleoides, donde también desempeña un papel en el desenrollamiento y la organización del mtDNA.
• Sufre corte y empalme alternativo y fosforilación; las variantes asociadas a enfermedades están vinculadas a trastornos mitocondriales primarios.
• Como miembro de la familia HMGB, TFAM utiliza sus cajas HMG en tándem para unirse al mtDNA, doblarlo y formar bucles, contribuyendo a la arquitectura de los nucleoides.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal 1–220 de TFAM humano, que incluye los dominios HMG-box en tándem; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca el TFAM de longitud completa.
• Para la transferencia Western, considere utilizar lisados enriquecidos en mitocondrias para una detección óptima; el peso molecular previsto es de aproximadamente 29 kDa, pero las modificaciones postraduccionales pueden causar un desplazamiento.
• Para inmunofluorescencia/IF e ICC, se prevé un patrón de tinción mitocondrial punteado; se recomienda la contratinción con un marcador mitocondrial para confirmar la localización.
• Al realizar ELISA, valore el anticuerpo frente a TFAM recombinante o lisados celulares para establecer las diluciones de trabajo óptimas.
• Debido a la alta conservación de la secuencia entre humano, ratón y rata, es probable que exista reactividad cruzada, pero valide el anticuerpo en su sistema modelo.

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