Anticuerpo policlonal de conejo anti-TFEB para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19484

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TFEB

• El factor de transcripción EB (TFEB), miembro de la familia MiT/TFE (también conocido como bHLHe35), actúa como regulador principal de la biogénesis lisosomal, la autofagia y el metabolismo energético (PubMed:21617040, PubMed:22343943, PubMed:22576015). Referencias relacionadas: PMID:21617040 PMID:22343943 PMID:22576015
• La disponibilidad de nutrientes controla la actividad de TFEB: la fosforilación dependiente de MTOR promueve la retención citosólica; la desfosforilación inducida por la inanición desencadena la importación nuclear y la activación transcripcional de los genes lisosomales y de autofagia (PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423). Referencias relacionadas: PMID:22343943 PMID:22576015 PMID:22692423
• La dimerización con otros miembros de la familia MiT/TFE, como TFE3 o MITF, es necesaria para una unión eficiente al ADN en las secuencias promotoras E-box y CLEAR-box (PubMed:1748288, PubMed:19556463, PubMed:29146937). Referencias relacionadas: PMID:1748288 PMID:19556463 PMID:29146937
• TFEB regula la localización lisosomal al inducir la expresión de PIP4P1 y promueve la autofagia durante la privación de glucosa en cooperación con ACSS2 (PubMed:29146937, PubMed:28552616). Referencias relacionadas: PMID:29146937 PMID:28552616
• En la inmunidad adaptativa, TFEB activa la expresión de CD40L en las células T, contribuyendo a las respuestas de anticuerpos dependientes del timo (por similitud).
• La proteína se localiza en el núcleo, el citoplasma y la membrana lisosomal, y su transporte entre estos compartimentos está controlado dinámicamente por señales nutricionales y de estrés.
• Durante una infección bacteriana, la alquilación de TFEB mediada por itaconato induce la translocación nuclear y la biogénesis lisosomal, facilitando la eliminación bacteriana (PubMed:35662396). Referencias relacionadas: PMID:35662396
• TFEB también desempeña funciones en la vascularización placentaria (por similitud) y está sujeto a múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación y la ubiquitinación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre la región C-terminal (aminoácidos 391-461) de TFEB humano, por lo que puede reconocer TFEB de longitud completa y posiblemente variantes con modificaciones postraduccionales; valide el anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente para confirmar su especificidad.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 52 kDa; considere utilizar protocolos de fraccionamiento nuclear/citoplasmático para monitorizar la translocación de TFEB en respuesta a estímulos.
• En IHC-P, deben optimizarse la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo primario; incluya tejidos de control positivo que expresen TFEB (por ejemplo, riñón e hígado) y controles negativos adecuados.
• Para IF/ICC, asegúrese de que las condiciones de fijación y permeabilización preserven la morfología nuclear; la tinción conjunta con marcadores lisosomales puede evaluar el estado de activación de TFEB.
• Al utilizar ELISA, valore cuidadosamente el anticuerpo e incluya las etapas correspondientes de bloqueo y lavado para minimizar el fondo.

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