Anticuerpo policlonal de conejo anti-TFPI para WB y ELISA - P10646

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del TFPI

• El TFPI (inhibidor de la vía del factor tisular), también conocido como inhibidor de la vía extrínseca (EPI) o inhibidor de la coagulación asociado a lipoproteínas (LACI), es un inhibidor de proteasas de serina de tipo Kunitz que regula de manera central la vía extrínseca de la coagulación.
• Inhibe directamente el factor Xa y, de manera dependiente del factor Xa, inhibe el complejo factor tisular/factor VIIa, suprimiendo así la generación de trombina y ejerciendo efectos antitrombóticos.
• El TFPI se sintetiza principalmente en las células endoteliales, en consonancia con su función en la hemostasia vascular, y se secreta al torrente sanguíneo.
• La proteína se asocia con lipoproteínas en el plasma y también se encuentra anclada a la membrana microsómica mediante un anclaje GPI, lo que indica la existencia de formas tanto solubles como unidas a la membrana.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la N-glucosilación, la formación de enlaces disulfuro y la unión de un anclaje GPI en el extremo C-terminal, procesos fundamentales para su estabilidad y localización.
• El corte y empalme alternativo del gen TFPI genera múltiples isoformas, que pueden diferir en sus regiones C-terminales y en su afinidad por las lipoproteínas y las superficies celulares.
• Dado su papel inhibidor, el TFPI es un factor anticoagulante clave; las deficiencias o la desregulación de este factor se han relacionado con trastornos trombóticos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 29-224 del TFPI humano y abarca el dominio Kunitz 1; esto sugiere que es adecuado para detectar isoformas de TFPI que contengan esta región en muestras humanas, de ratón y de rata.
• Para Western blot, la banda prevista se encuentra alrededor de 35 kDa; sin embargo, la glucosilación y la posible eliminación del anclaje GPI pueden provocar múltiples bandas o manchas difusas en lisados celulares o muestras de plasma.
• Para reducir la unión inespecífica típica de los anticuerpos policlonales, considere optimizar las condiciones de bloqueo y lavado al utilizar muestras complejas como el suero.
• Para aplicaciones de ELISA, el TFPI es una proteína secretada, por lo que el plasma o los sobrenadantes de cultivo pueden ser tipos de muestra adecuados.
• Valide el rendimiento del anticuerpo bajo sus condiciones experimentales específicas, ya que se ha informado de reactividad cruzada con el TFPI de ratón y rata, pero esta debe verificarse en el sistema de muestras correspondiente.

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