Anticuerpo monoclonal anti-TGF beta 1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01137

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TGF beta 1

• TGFB1 codifica la proproteína del factor de crecimiento transformante beta-1, que se escinde proteolíticamente para generar el péptido asociado a la latencia (LAP) y la citocina TGF-beta-1 biológicamente activa.
• TGF-beta-1 se secreta como un complejo latente inactivo; la activación ocurre cuando las integrinas (ITGAV:ITGB6 o ITGAV:ITGB8) se unen a LAP, provocando una distorsión conformacional y la liberación de la citocina activa (PubMed:22278742, PubMed:28117447). Referencias relacionadas: PMID:22278742 PMID:28117447
• El TGF-beta-1 activo transmite señales a través de los receptores de TGF-beta (TGFBR1 y TGFBR2), lo que conduce a la fosforilación de SMAD2/3 y a su translocación nuclear para regular la expresión génica (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Referencias relacionadas: PMID:20207738 PMID:25893292 PMID:29483653 PMID:30696809
• Es una citocina multifuncional que puede inducir la transición epitelial-mesenquimal (EMT), la migración celular y la producción sostenida de colágeno mediante la activación de CREB3L1 (PubMed:25310401, PubMed:25893292, PubMed:30696809). Referencias relacionadas: PMID:25310401 PMID:25893292 PMID:30696809
• TGF-beta-1 modula la diferenciación de las células inmunitarias: a concentraciones altas promueve el desarrollo de células T reguladoras (Treg), mientras que a concentraciones bajas, en presencia de IL-6/IL-21, favorece la diferenciación de células Th17 (por similitud).
• En el hueso, se expresa en gran medida y actúa como un potente estimulador de la formación ósea osteoblástica, la quimiotaxis, la proliferación y la diferenciación; también es abundante en el cartílago articular y aumenta en la osteoartritis (PubMed:11746498, PubMed:17827158). Referencias relacionadas: PMID:11746498 PMID:17827158
• La localización subcelular se encuentra principalmente en el espacio extracelular y la matriz extracelular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la escisión en residuos dibásicos, la formación de enlaces disulfuro y la glucosilación, procesos esenciales para el plegamiento y la dimerización adecuados.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 279–390 de la proproteína TGFB1 humana) se encuentra dentro del dominio LAP; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer la proproteína de longitud completa y LAP, pero no necesariamente el dímero maduro de TGF‑β1. Valide la especificidad de detección utilizando proteínas recombinantes o lisados celulares adecuados.
• Para Western Blot, se espera una banda de aproximadamente 44 kDa correspondiente a la proproteína en condiciones reductoras; el monómero maduro (~12,5 kDa) puede observarse o no, dependiendo de la accesibilidad del epítopo.
• Para la inmunohistoquímica y la inmunofluorescencia, deben considerarse las condiciones de recuperación antigénica y los métodos de fijación, especialmente al trabajar con tejidos ricos en matriz extracelular (por ejemplo, hueso y cartílago), donde se acumulan complejos latentes.
• El rendimiento del ELISA puede evaluarse recubriendo la placa con LAP o proproteína recombinante y analizando diluciones seriadas del anticuerpo.
• Se ha informado reactividad cruzada con proteínas de ratón y de rata, pero recomendamos verificar la unión en el sistema experimental específico utilizado.

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