Anticuerpo policlonal de conejo anti-receptor II del TGF beta (TGFBR2) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del receptor tipo 2 del TGF-beta

• Identidad y estructura del receptor: El receptor tipo 2 del TGF-beta (TGFBR2) es una serina/treonina cinasa transmembrana de tipo I de paso único que actúa como receptor de alta afinidad para las citocinas TGF-beta TGFB1, TGFB2 y TGFB3. Está codificado por el gen TGFBR2 en el cromosoma 3 humano, y el corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas, algunas de las cuales están relacionadas con el cáncer colorrectal hereditario no polipósico, el aneurisma aórtico y la craneosinostosis.
• Señalización canónica dependiente de SMAD: Tras la unión del ligando, TGFBR2 se asocia con dos receptores de tipo I (TGFBR1) para formar un complejo heterotetramérico. El dominio cinasa constitutivamente activo de TGFBR2 fosforila TGFBR1, que a su vez activa SMAD2 y SMAD3. Las SMAD fosforiladas forman un complejo con SMAD4 y se translocan al núcleo para regular la transcripción de genes diana del TGF-beta, controlando la detención del ciclo celular, la apoptosis, la diferenciación y la producción de matriz extracelular.
• Señalización no canónica: Además de la vía canónica de SMAD, TGFBR2 activa cascadas independientes de SMAD, incluidas las vías de las MAP cinasas, PI3K/AKT y GTPasas similares a Rho, para modular la migración, proliferación y supervivencia celular.
• Unión al ligando y afinidad: TGFBR2 se une a TGFB1, TGFB2 y TGFB3 con una afinidad en el rango picomolar sin requerir correceptores, mediando el paso inicial de la transducción de señales del TGF-beta.
• Localización subcelular: TGFBR2 se localiza principalmente en la membrana celular y en las balsas de membrana, y se ha detectado una forma secretada en entornos extracelulares, en consonancia con su función en la comunicación entre células.
• Modificaciones postraduccionales: El receptor es una glucoproteína con múltiples enlaces disulfuro intramoleculares esenciales para su estructura terciaria. Sufre fosforilación en residuos de serina y treonina dentro de su dominio cinasa y cola citoplasmática, lo que modula su actividad y la señalización posterior.
• Resumen de palabras clave: El registro de UniProt destaca su participación en la apoptosis, la regulación del crecimiento, la diferenciación y asociaciones con enfermedades como el aneurisma aórtico, la craneosinostosis y el cáncer colorrectal hereditario no polipósico.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 23–280 de TGFBR2 humano, cubriendo el dominio extracelular N-terminal de unión al ligando. Esta región está relativamente conservada entre humanos, ratones y ratas, lo que explica la reactividad cruzada observada; sin embargo, los patrones de glucosilación endógena pueden influir en la accesibilidad del epítopo en muestras nativas.
• Consideraciones para Western blot (WB): El peso molecular previsto de TGFBR2 es de aproximadamente 65 kDa; sin embargo, debido a la glucosilación, puede observarse un desplazamiento de la banda. Utilice condiciones reductoras para obtener una resolución clara. Valide el resultado en lisados de control positivo, como HeLa y A549, que expresan TGFBR2.
• Consejos para inmunohistoquímica (IHC-P): Para secciones incluidas en parafina, optimice la recuperación antigénica, por ejemplo, con tampón de citrato a pH 6,0 o EDTA a pH 9,0, y considere probar varias concentraciones del anticuerpo primario, normalmente en el intervalo de 1:50–1:500. Se espera tinción de membrana; la inclusión de un inhibidor de fosfatasa en los tampones de bloqueo puede ayudar a conservar los epítopos dependientes de la fosforilación.
• Orientación para inmunofluorescencia (IF/ICC): Dado que TGFBR2 es un receptor transmembrana, es necesaria la permeabilización con Triton X-100 o saponina para detectar epítopos intracelulares. Se recomienda la tinción conjunta con marcadores de membrana u orgánulos para confirmar la localización. El anticuerpo también puede reconocer la forma secretada, por lo que se aconseja una fijación cuidadosa para evitar el fondo extracelular.
• Uso en ELISA: Este anticuerpo policlonal puede evaluarse como reactivo de captura o detección en formatos de ELISA tipo sándwich. Realice titulaciones en tablero de ajedrez para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento (1–10 µg/mL) y detección, y valide el ensayo con estándares de proteína TGFBR2 recombinante.

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