Anticuerpo policlonal de conejo Anti-TIM-3/HAVCR2 para WB, IHC-P, ELISA - Q8TDQ0

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de TIM-3/HAVCR2

• TIM-3 (receptor celular 2 del virus de la hepatitis A) es una proteína transmembrana de tipo I que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas y a la familia TIM, también conocida como proteína 3 que contiene dominio de inmunoglobulina y mucina de célula T (TIMD-3) y CD366.
• Funciona principalmente como receptor de punto de control inmunitario inhibidor en las células T, atenúa la señalización del TCR y promueve el agotamiento de las células T; inhibe las respuestas autoinmunes y aloinmunes mediadas por Th1, contribuyendo a la tolerancia inmunológica (PMID:14556005).
  Referencias relacionadas: PMID:14556005
• Actúa como receptor de galectina-9 (LGALS9), que induce la apoptosis de las células T y suprime las funciones efectoras, aunque esta interacción ha sido debatida (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261).
  Referencias relacionadas: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• También se une a la fosfatidilserina (PtSer) de forma dependiente de calcio, media la fagocitosis de células apoptóticas y regula la inmunidad innata, particularmente en células dendríticas y macrófagos (PMID:24825777).
  Referencias relacionadas: PMID:24825777
• Se expresa en varios subconjuntos de células inmunitarias: linfocitos Th1, células T reguladoras (Treg), células dendríticas, células asesinas naturales (NK) y tejidos epiteliales; su expresión se upregula en infecciones virales crónicas como VHC y VIH, contribuyendo al agotamiento inmunitario.
• Desempeña roles duales en la inmunidad innata: en las células NK, puede aumentar la producción de IFN-gamma en respuesta a LGALS9 (PMID:22323453) o suprimir la citotoxicidad mediada por células NK (PMID:22383801).
  Referencias relacionadas: PMID:22323453 PMID:22383801
• Sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación, palmitoilación y fosforilación; presenta enlaces disulfuro y un dominio de tipo V similar a Ig esencial para la unión al ligando.
• Localización subcelular: predominantemente en la membrana celular y en las uniones celulares, donde participa en la formación de la sinapsis inmune y la señalización.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante correspondiente al dominio extracelular (aa22-202), que es adecuado para detectar TIM-3 nativo y desnaturalizado en WB, IHC-P y ELISA.
• Para el análisis por WB, considere usar condiciones reductoras y lisados de células completas de Jurkat o células T primarias activadas para confirmar la banda esperada de aproximadamente 33 kDa, aunque la glicosilación puede causar un peso molecular aparente mayor.
• Para IHC-P, pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6,0); valide el patrón de tinción en tejidos de amígdala humana o ganglio linfático, con controles negativos apropiados.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede evaluar como reactivo de captura o detección; realice valoraciones por tablero de ajedrez con TIM-3 recombinante recubierto y muestras positivas conocidas.
• Dada la reactividad cruzada reportada con ratón y rata, considere verificar la homología de secuencia de la región del inmunógeno entre especies y valide el anticuerpo en modelos de roedores relevantes (por ejemplo, lisados de bazo de ratón, secciones de tejido de rata).

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