Anticuerpo policlonal de conejo Anti-TLR6 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y2C9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de TLR6

• TLR6 (receptor tipo Toll 6) es un miembro de la familia de receptores tipo Toll (TLR), que desempeña un papel fundamental en el reconocimiento de patógenos y la activación de la inmunidad innata. Es una proteína de membrana de tipo I de paso único que contiene un dominio extracelular con repeticiones ricas en leucina (LRR), un dominio transmembrana y un dominio citoplasmático Toll/receptor de interleucina-1 (TIR).
• TLR6 reconoce específicamente lipopéptidos diacilados y, en menor medida, triacilados de bacterias Gram-positivas y hongos. Forma un complejo de activación con TLR2, CD14 y CD36 en la superficie celular, desencadenando la señalización desde las balsas de membrana y la posterior orientación al aparato de Golgi. Referencias relacionadas: PMID:16880211 PMID:20037584
• La señalización aguas abajo de TLR2:TLR6 se media a través de MYD88 y TRAF6, lo que conduce a la activación de NF-kappa-B, la secreción de citocinas y la respuesta inflamatoria. En cooperación con TLR2, reconoce componentes microbianos como MALP-2 de micoplasma, factor soluble de tuberculosis (STF), modulina soluble en fenol (PSM) y OspA-L de B. burgdorferi. Referencias relacionadas: PMID:11441107
• En una vía distinta, TLR6 puede formar un complejo con TLR4 para promover la inflamación estéril en monocitos/macrófagos en respuesta a lipoproteínas de baja densidad oxidadas (oxLDL) o amiloide-beta 42, con CD36 como sensor inicial. Esto conduce a la producción dependiente de NF-kappa-B de CXCL1, CXCL2 y CCL9 (vía MYD88) y CCL5 (vía TICAM1), así como a la secreción de IL1B. Referencias relacionadas: PMID:11441107 PMID:20037584
• Subcelularmente, TLR6 se localiza en la membrana celular, dentro de vesículas citoplasmáticas, en la membrana del fagosoma, en las balsas de membrana y en el aparato de Golgi, lo que refleja su tráfico dinámico después de la activación.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación y formación de enlaces disulfuro, lo que coincide con su presencia en la vía secretora y en la superficie celular.
• TLR6 se expresa en monocitos, células dendríticas inmaduras CD11c+, pre-células dendríticas plasmacitoides y células endoteliales de microvasos dérmicos, lo que indica su papel en la vigilancia inmunológica en tejidos de barrera.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, que pueden modular la especificidad por ligando o las señales generadas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de la región C-terminal (aa 697–796) del TLR6 humano, que probablemente corresponde al dominio citoplasmático. Este diseño favorece el reconocimiento de la población total de TLR6 independientemente de su glicosilación o de la eliminación del ectodominio.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular predicho es de ~92 kDa, pero la forma glicosilada madura a menudo migra con un peso molecular aparente mayor. Utilice condiciones reductoras y valide la especificidad de la banda con controles adecuados.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se espera tinción en la membrana plasmática y vesículas intracelulares. Se requiere permeabilización con detergente para detectar las poblaciones intracelulares. La co-tinción con marcadores de orgánulos puede revelar el tráfico inducido por la activación.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con TLR6 humano y de ratón; verifique la reactividad en la especie y el tejido deseados mediante controles positivos y negativos.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden desarrollar usando este anticuerpo policlonal como reactivo de captura o detección; considere combinarlo con un anticuerpo monoclonal para mejorar la especificidad.

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