Anticuerpo policlonal de conejo anti-TNF-α para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01375

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del TNF-α

• El TNF-α (caquectina, TNFSF2) es una citocina proinflamatoria de la superfamilia del factor de necrosis tumoral, secretada principalmente por los macrófagos. Se une a los receptores TNFRSF1A/TNFR1 y TNFRSF1B/TNFBR para mediar diversas respuestas celulares.
• Actúa como un potente pirógeno que causa fiebre, ya sea directamente o mediante la secreción de interleucina-1, y está implicado en la inducción de la caquexia. En determinadas condiciones, puede estimular la proliferación y diferenciación celular.
• Deteriora la función de las células T reguladoras (Treg) en la artritis reumatoide al aumentar la expresión de la proteína fosfatasa 1 (PP1), que desfosforila FOXP3 en Ser-418, inactivando así FOXP3. Referencias relacionadas: PMID:23396208
• Actúa como mediador clave de la muerte celular en la acción anticancerígena de neutrófilos estimulados por BCG combinados con un mimético de DIABLO/SMAC en líneas celulares de cáncer de vejiga. Referencias relacionadas: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Desempeña un papel en la angiogénesis al inducir sinérgicamente la producción de VEGF junto con IL1B e IL6. Referencias relacionadas: PMID:12794819
• Induce resistencia a la insulina en los adipocitos al inhibir la fosforilación de tirosina de IRS1 inducida por la insulina y la captación de glucosa, parcialmente mediante la degradación de GKAP42.
• A nivel subcelular, el TNF-α se encuentra en la membrana celular como proteína transmembrana y también se secreta en forma soluble.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 77-233 del TNF humano (NP_000585.2), y se dirige a una región común tanto a las formas unidas a la membrana como a las formas solubles. Para el Western blot, se recomienda considerar lisados de macrófagos estimulados o proteína recombinante como control positivo.
• Para IHC-P, puede ser necesario optimizar la recuperación antigénica; se sugiere comenzar con un tampón de citrato mediado por calor (pH 6,0).
• En IF-P, debe optimizarse la permeabilización de la membrana para detectar las reservas intracelulares de TNF-α.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse de la combinación de este anticuerpo policlonal con un anticuerpo monoclonal compatible para formatos de captura y detección.
• Se indica reactividad cruzada con el TNF-α de ratón y de rata, lo que ofrece flexibilidad para estudios traslacionales, aunque se recomienda realizar una validación específica para cada especie.

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