Anticuerpo policlonal anti-TRIM25 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q14258

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TRIM25

• Codifica una ligasa E3 de ubiquitina/ISG15 que desempeña un papel fundamental en la inmunidad innata al mediar la poliubiquitinación ligada a 'Lys-63' de RIG-I (DDX58) e IFIH1 (MDA5), lo que conduce a la producción de interferón de tipo I tras una infección viral. Referencias relacionadas: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849

• Funciona como una proteína sensible a los estrógenos y media la acción estrogénica mediante la ubiquitinación y degradación proteasómica de ZFHX3, vinculando así la señalización hormonal con el recambio de proteínas. Referencias relacionadas: PMID:22452784

• Actúa como una ligasa E3 de ISG15, promoviendo la ISGilación de 14-3-3 sigma (SFN) y participando en vías más amplias de ISGilación. Referencias relacionadas: PMID:16352599, PMID:17069755

• Media la poliubiquitinación ligada a 'Lys-63' de la proteína antiviral ZAP/ZC3HAV1, necesaria para una unión óptima al ARNm viral diana. Referencias relacionadas: PMID:28060952, PMID:28202764

• Promueve el reinicio de las horquillas de replicación detenidas al interactuar con el andamiaje KHDC3L-OOEP y ubiquitinar la helicasa BLM, facilitando el reclutamiento de BLM a los sitios de daño del ADN.

• Participa en la supresión de la autofagia mediante la ubiquitinación y degradación del receptor autofágico p62/SQSTM1. Referencias relacionadas: PMID:40542578

• Ubiquitina sustratos implicados en la formación de gránulos de estrés, la degradación del ARNm mediada por codones de terminación prematuros, la síntesis de nucleósidos y la traducción/estabilidad del ARNm, según han revelado estudios proteómicos. Referencias relacionadas: PMID:36067236

• Se localiza subcelularmente en el citoplasma, los gránulos de estrés y el núcleo, lo que refleja sus diversas funciones. Pertenece a la familia de proteínas TRIM, caracterizada por un dedo RING, uno o varios dedos de zinc B-box y un dominio de hélice superenrollada.

• Se expresa de forma ubicua, con una expresión notable a nivel proteico en tumores de mama.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, se espera una banda cercana a 71 kDa; utilice controles positivos adecuados, como lisados de células HeLa, y valide con un péptido bloqueante o un control de silenciamiento.
• En IHC-P, considere optimizar las condiciones de recuperación antigénica, por ejemplo, tampón de citrato a pH 6,0, y valide con tejidos conocidos como positivos para TRIM25, como el carcinoma mamario.
• Para IF/ICC, pruebe protocolos de fijación/permeabilización, por ejemplo, metanol frente a PFA/Triton, ya que las distintas localizaciones, como el citoplasma, los gránulos de estrés y el núcleo, pueden requerir condiciones específicas.
• Este anticuerpo policlonal presenta reactividad cruzada con ratón y rata; verifique la reactividad específica de cada especie en su sistema experimental comparando la homología de secuencia de la región del inmunógeno.
• Para IP, ajuste cuidadosamente la concentración del anticuerpo para minimizar la unión inespecífica; incluya un control de isotipo y un paso de preaclarado.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del recubrimiento con el fragmento del inmunógeno; confirme la linealidad y especificidad utilizando proteína TRIM25 recombinante.

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