Anticuerpo Policlonal Anti-TTK para WB, IF/ICC, ELISA - P33981

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de TTK

• La proteína quinasa de doble especificidad TTK (también conocida como MPS1) es una quinasa de serina/treonina y tirosina que desempeña un papel crítico en el punto de control del ensamblaje del huso mitótico, retrasando la anafase hasta que todos los cromosomas estén correctamente biorientados, y en la corrección de los enlaces erróneos entre cinetocoros y microtúbulos.
  Referencias relacionadas: PMID:18243099, PMID:28441529, PMID:29162720
• TTK fosforila MAD1L1 para promover el punto de control del ensamblaje del huso mitótico.
  Referencias relacionadas: PMID:18243099, PMID:29162720
• Fosforila CDCA8/Borealin, mejorando la actividad de la quinasa Aurora B (AURKB) en el cinetocoro.
  Referencias relacionadas: PMID:18243099
• La fosforilación de SKA3 en Ser-34 por TTK desencadena la disociación del complejo SKA de los microtúbulos, desestabilizando los enlaces microtúbulo-cinetocoro.
  Referencias relacionadas: PMID:28441529
• TTK fosforila KNL1, KNTC1 y también se autofosforila, contribuyendo a la señalización del punto de control.
  Referencias relacionadas: PMID:28441529
• Fosforila MCRS1, mejorando el reclutamiento de KIF2A a los extremos negativos de los microtúbulos del huso, lo que promueve la alineación cromosómica.
  Referencias relacionadas: PMID:30785839
• La proteína está presente en líneas celulares que proliferan rápidamente, lo que es consistente con sus funciones mitóticas.
• TTK contiene un dominio quinasa que se une a ATP, sufre acetilación y empalme alternativo, y está catalogada como una fosfoproteína del proteoma de referencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot, el inmunógeno se dirige a la región C-terminal (aa 536-789) del TTK humano. El peso molecular previsto es de ~97 kDa; confirme la migración de la banda en sus lisados y condiciones específicos.
• En inmunofluorescencia/ICC, TTK se localiza en los cinetocoros durante la mitosis. Utilice protocolos de permeabilización y fijación apropiados para una tinción óptima del cinetocoro. Valide en poblaciones celulares mitóticas (por ejemplo, células tratadas con nocodazol).
• Para aplicaciones de ELISA, valore el anticuerpo tanto como reactivo de captura como de detección para determinar las concentraciones de trabajo adecuadas. Incluya controles positivos y negativos.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con TTK humano, de ratón y de rata, pero la homología de secuencia en la región del inmunógeno sugiere una posible reactividad con otras especies; se recomienda validación en la especie objetivo.
• Considere utilizar un control de carga apropiado y anticuerpos fosfo-específicos para estudios funcionales de la actividad quinasa de TTK.

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