Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-APL Tipo S (PML/RARA) para WB, ELISA - P29590/P10276

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PML

• PML actúa como la proteína andamio de los cuerpos nucleares de PML (PML-NBs) implicados en la supresión de tumores, regulación transcripcional, apoptosis, senescencia, respuesta al daño del ADN y defensa antiviral. Inhibe la exportación nuclear de ARNm mediada por EIF4E al reducir la afinidad de EIF4E por la capa 5' m7G de los ARNm diana. Referencias relacionadas: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• La isoforma PML-4 regula crucialmente la apoptosis y la supresión del crecimiento: activa RB1, inhibe AKT1 a través de fosfatasas, modula negativamente la vía PI3K (inhibiendo MTOR, activando PTEN) y regula positivamente p53 al promover la acetilación/fosforilación y bloquear la degradación mediada por MDM2.
• PML-4 funciona como un represor transcripcional de TBX2 durante la senescencia celular, requiere un complejo RBL2/E2F4 funcional, regula la reparación de roturas de doble cadena de ADN a través de la interacción con WRN, controla negativamente la telomerasa al unirse a TERT y modula la localización nuclear de PER2 y el ritmo circadiano.
• Las isoformas nucleares (PML-1 a PML-5) cooperan con SATB1 en el remodelado local de bucles de cromatina y la regulación de la expresión génica en el locus MHC-I; PML-2 es necesaria para la transcripción eficiente de genes MHC II inducida por IFN-gamma a través de la regulación de CIITA.
• PML exhibe una amplia actividad antiviral contra virus de ADN y ARN a través de diversos mecanismos específicos de isoforma, incluida la secuestración de cápsides virales, la inhibición de la síntesis de ARNm/proteínas virales y la restricción dependiente de SUMO de las polimerasas virales.
• Funciona como una ligasa E3 de proteínas SUMO, con las isoformas PML-3 y PML-6 mostrando la mayor actividad de sumoilación; sumoila dianas virales y celulares, como la proteína inmediata temprana IE1 del HHV-5. Referencias relacionadas: PMID:20972456 PMID:28250117
• Subcelularmente, PML se localiza en el núcleo (nucleoplasma, cuerpos de PML, nucleolo), citoplasma, membrana del retículo endoplásmico y membrana del endosoma temprano; los PML-NBs se ven alterados en la leucemia promielocítica aguda por la oncoproteína PML-RARA.
• PML pertenece a la familia de proteínas TRIM (TRIM19), contiene dominios dedo de zinc RING, B-box y de hélice superenrollada; el empalme alternativo produce múltiples isoformas con funciones biológicas y distribuciones subcelulares distintas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• La mezcla de inmunógenos de péptidos del extremo C de PML y del extremo N de RARA está diseñada para dirigirse a la unión de fusión PML/RARA; considere que es posible la reactividad con PML o RARA de tipo salvaje y debe validarse utilizando modelos celulares positivos versus negativos para la fusión.
• Para Western blot, pueden aparecer múltiples bandas debido a las isoformas de PML (~47–50 kDa) y las variantes de RARA (~62–97 kDa); la proteína de fusión PML-RARA puede migrar de manera diferente, por lo que se deben usar controles positivos de APL apropiados (por ejemplo, la línea celular NB4).
• ELISA puede emplearse para cribado o titulación; la proteína recombinante PML-RARA o lisados celulares de muestras de pacientes con APL pueden servir como controles positivos.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede ofrecer una detección robusta pero requiere una optimización cuidadosa del bloqueo y la dilución del anticuerpo para minimizar el fondo inespecífico.
• El producto se envía en bolsa de hielo; al recibirlo, almacénelo a la temperatura recomendada para mantener la estabilidad a largo plazo.

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