Anticuerpo policlonal de conejo anti-tirosinasa para WB, IHC-P, ELISA - P14679

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la tirosinasa

• La tirosinasa es una oxidasa que contiene cobre y cataliza el paso inicial y limitante de la velocidad en la producción de melanina: la hidroxilación de la tirosina a DOPA y, posteriormente, la oxidación de la DOPA a DOPA-quinona. Referencias relacionadas:
  PMID:28661582
• La enzima también se conoce como monooxigenasa de monofenol y antígeno de rechazo tumoral AB, y está asociada con trastornos de la pigmentación como el albinismo oculocutáneo de tipo 1 (OCA1) y el síndrome de Waardenburg.
• La tirosinasa se localiza en la membrana del melanosoma y en el melanosoma, donde participa en la producción de pigmento.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glucosilación; la proteína es una glucoproteína.
• Es una proteína unida a la membrana con una única hélice transmembrana.
• La tirosinasa está clasificada como un antígeno tumoral y puede participar en el reconocimiento inmunitario en el melanoma.
• El corte y empalme alternativo da lugar a múltiples variantes de transcritos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 20-340) cubre una gran parte de la proteína, incluido el dominio catalítico central; considere utilizar este anticuerpo para detectar tanto las formas precursoras como las maduras de la tirosinasa.
• Para el Western blot, las líneas celulares de melanoma humano (por ejemplo, SK-MEL-28) o los tejidos ricos en melanocitos pueden servir como controles positivos; el peso molecular previsto es de aproximadamente 60 kDa, aunque la glucosilación puede provocar desplazamientos.
• En IHC-P, tenga en cuenta que el pigmento de melanina de los melanocitos puede causar fondo; deben emplearse métodos adecuados de bloqueo y detección para distinguir la señal específica.
• Este anticuerpo reacciona con muestras humanas y de rata, lo que permite realizar estudios entre especies en modelos de pigmentación de roedores.
• Para ELISA, considere utilizar la proteína de fusión recombinante empleada como inmunógeno como antígeno de recubrimiento o estándar para la cuantificación.

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