Anticuerpo policlonal de conejo anti-tirosina hidroxilasa para WB, IF/ICC, ELISA - P07101

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la tirosina hidroxilasa (TH)

• La tirosina hidroxilasa (TH) cataliza el paso limitante de la velocidad en la biosíntesis de catecolaminas: la conversión de L-tirosina en L-DOPA, un precursor de la dopamina, la noradrenalina y la adrenalina. Esta reacción utiliza tetrahidrobiopterina y oxígeno molecular; también puede hidroxilar la fenilalanina y el triptófano con menor especificidad. Referencias relacionadas: PMID:15287903, PMID:1680128, PMID:17391063, PMID:24753243, PMID:34922205, PMID:8528210
• La TH pertenece a la familia de las hidroxilasas de aminoácidos aromáticos dependientes de biopterina y requiere hierro como cofactor.
• El corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas; algunas carecen de actividad catalítica.
• Se expresa principalmente en el cerebro y las glándulas suprarrenales, en consonancia con su función en la síntesis de neurotransmisores.
• La localización subcelular incluye el citoplasma (región perinuclear), el núcleo, las terminales axónicas y las vesículas sinápticas.
• La fosforilación regula la actividad de la TH; se ha identificado como una fosfoproteína en estudios de proteómica.
• Las mutaciones de la TH asociadas a enfermedades están relacionadas con la distonía DYT5b, la enfermedad de Parkinson y el parkinsonismo.

Orientación experimental y consejos técnicos

• En Western blot (WB), puede detectarse una banda esperada de aproximadamente 59 kDa; se debe confirmar utilizando un lisado de control positivo de tejido cerebral o suprarrenal. Los tamaños específicos de las isoformas pueden variar.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), puede ser necesaria la permeabilización para acceder a las reservas citoplasmáticas y nucleares de TH. Valide la tinción en líneas celulares relevantes (por ejemplo, el neuroblastoma SH-SY5Y) o en neuronas primarias.
• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético, el bloqueo con el péptido inmunizante puede ayudar a confirmar la especificidad del anticuerpo.
• Para ELISA, optimice empíricamente las condiciones de recubrimiento y detección. El anticuerpo detecta la TH humana, de ratón y de rata, lo que permite desarrollar ensayos entre especies.
• La reactividad cruzada con ratón y rata ha sido validada; aun así, deben incluirse controles adecuados para los nuevos sistemas modelo.

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