Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-U1A/SNRPA para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09012

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de U1A/SNRPA

• U1A (proteína ribonucleoproteínica nuclear pequeña U1 A) es un componente del U1 snRNP, que desempeña un papel fundamental en el reconocimiento del sitio de empalme 5' del pre-mARN y en los pasos iniciales del ensamblaje del espliceosoma. El U1 snRNP es el primero en unirse al pre-mARN, facilitando la unión posterior de U2 y el tri-snRNP U4/U6/U5.
• SNRPA se une específicamente al tallo-bucle II del ARNsn U1, contribuyendo a la estabilización del complejo U1 snRNP–pre-mARN y a la definición precisa del sitio de empalme 5'.
• En una forma libre de snRNP (SF-A), U1A puede participar en el acoplamiento del empalme y la poliadenilación del pre-mARN, y muestra una preferencia de unión por el motivo 5'-UGCAC-3' en los ARN.
• La proteína se localiza exclusivamente en el núcleo, lo cual es consistente con su función en el procesamiento del pre-mARN.
• U1A sufre varias modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, fosforilación y metilación, que pueden regular su actividad e interacciones.
• El peso molecular de la isoforma canónica es de aproximadamente 31,3 kDa y pertenece a la familia de las ribonucleoproteínas con motivos característicos de reconocimiento de ARN (RRM).
• Los procesos biológicos clave asociados con U1A/SNRPA incluyen el empalme de mARN, el procesamiento de mARN y el ensamblaje del espliceosoma, y es un componente del complejo U1 snRNP.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la transferencia Western (Western blotting), se espera una banda a aproximadamente 31 kDa correspondiente a U1A/SNRPA. Valide la detección utilizando extractos nucleares relevantes o lisados celulares totales de muestras humanas, de ratón o de rata.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígenos; optimice los protocolos basados en citrato o EDTA e incluya los controles apropiados para la tinción nuclear.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), asegure una permeabilización nuclear eficiente (por ejemplo, tratamiento con Triton X-100) y considere la tinción simultánea con un marcador del espliceosoma o DAPI para confirmar la localización nuclear.
• Este anticuerpo es adecuado para ELISA; se puede utilizar para detectar U1A/SNRPA recombinante o nativa. Se recomienda la optimización de la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo.
• El inmunógeno abarca la proteína de longitud completa (aa 1–282), lo que hace probable que el anticuerpo reconozca tanto las formas nativas como desnaturalizadas, pero se debe descartar la reactividad cruzada con otros componentes del U1 snRNP mediante los controles adecuados.

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