Anti-UBA1/7 Conejo PolymAb® para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P22314 / P41226

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de UBA1/7

• UBA1 (enzima activadora de modificadores tipo ubiquitina 1) es la enzima E1 primaria que inicia la conjugación de ubiquitina, dirigiendo proteínas para degradación proteosomal (PubMed:1447181, PubMed:1606621, PubMed:33108101). Referencias relacionadas: PMID:1447181 PMID:1606621 PMID:33108101
• Activa la ubiquitina mediante adenilación dependiente de ATP de su glicina C-terminal, formando un intermedio tioéster ubiquitina-E1 esencial para la posterior transferencia E2/E3 (PubMed:1447181). Referencias relacionadas: PMID:1447181
• UBA1 juega un papel crítico en la respuesta al daño del ADN facilitando la formación de focos inducidos por radiación y reclutando proteínas de reparación como TP53BP1 y BRCA1 a los sitios de daño (PubMed:22456334). Referencias relacionadas: PMID:22456334
• La proteína se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluyendo el citoplasma, el núcleo y las mitocondrias, consistente con sus diversas funciones.
• UBA1 se expresa ubicuamente en tejidos, con detección confirmada en eritrocitos a nivel proteico.
• Las modificaciones postraduccionales de UBA1 incluyen acetilación y fosforilación, y las mutaciones en el gen se asocian con trastornos neurodegenerativos y el síndrome VEXAS.
• La proteína UBA7 (enzima activadora de modificadores tipo ubiquitina 7) es una enzima E1 relacionada con especificidad distinta para ISG15, pero comparte homología estructural con UBA1, permitiendo el reconocimiento cruzado por este anticuerpo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El péptido inmunógeno (aa959-1058 de UBA1) se encuentra dentro de una región que comparte homología significativa con UBA7, lo que explica la especificidad de doble diana. Valide la especificidad utilizando controles de knockdown o knockout en sus muestras.
• En Western blot (WB), espere bandas predominantes a ~118 kDa para UBA1 y ~112 kDa para UBA7, con posibles variaciones dependiendo de modificaciones postraduccionales o isoformas de empalme.
• Para inmunofluorescencia (IF) e inmunohistoquímica (IHC), tenga en cuenta que UBA1 se distribuye en el citoplasma, núcleo y mitocondrias; optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar la señal en estos compartimentos.
• Para aplicaciones de ELISA, considere usar proteína UBA1 recombinante o lisados celulares enriquecidos con el objetivo como estándares, y realice pruebas de reactividad cruzada contra UBA7 para confirmar la detección.
• Como anticuerpo monoclonal recombinante de conejo (Rabbit PolymAb®), este reactivo ofrece alta consistencia de lote a lote; sin embargo, las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente para cada ensayo y tipo de muestra.

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