Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-UBE2C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00762

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de UBE2C

• UBE2C (UBCH10) es un miembro de la familia de enzimas conjugadoras de ubiquitina (E2), responsable de aceptar ubiquitina de la enzima E1 y catalizar su transferencia a sustratos.
• La proteína es un cofactor esencial del complejo promotor de la anafase/ciclosoma (APC/C), una ligasa de ubiquitina E3 crítica que regula la progresión mitótica al dirigir sustratos clave para su degradación por el proteasoma.
• UBE2C cataliza principalmente cadenas de poliubiquitina unidas por 'Lys-11', un enlace no canónico crucial para el reconocimiento de sustratos por APC/C y su posterior degradación.
• Además de las cadenas de Lys-11, UBE2C también puede mediar la poliubiquitinación unida por 'Lys-48' in vitro, destacando su versatilidad en la formación de cadenas de ubiquitina.
• El empalme alternativo del gen UBE2C puede generar múltiples variantes de transcripción, produciendo potencialmente isoformas con propiedades regulatorias distintas.
• Las modificaciones postraduccionales, incluida la fosforilación y acetilación, están indicadas por palabras clave de UniProt, lo que sugiere una regulación dinámica de la actividad de UBE2C durante el ciclo celular.
• La proteína está altamente conservada entre especies, lo que permite la reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata, como confirma la validación del anticuerpo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno de longitud completa (aa 1-179) puede permitir el reconocimiento de todas las isoformas de UBE2C; por lo tanto, podrían observarse bandas de pesos moleculares ligeramente diferentes en algunos tejidos o estados celulares.
• Para Western blot, utilice lisados de células arrestadas en mitosis (por ejemplo, tratamiento con nocodazol) como control positivo, ya que los niveles de UBE2C alcanzan su punto máximo durante la mitosis. Se espera una banda cerca de los 20 kDa.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), considere la recuperación de antígeno por calor con tampón de citrato (pH 6.0) y valide en tejidos positivos conocidos, como tumores altamente proliferativos o testículo.
• En inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo policlonal puede enriquecer UBE2C y sus socios de interacción; se recomienda un pre-limpieza con IgG de control para reducir la unión inespecífica.
• Para ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo utilizando proteína UBE2C recombinante como estándar; tenga en cuenta que los anticuerpos policlonales pueden mostrar una ligera variabilidad entre lotes.
• Incluya siempre controles relevantes (por ejemplo, lisados con knockout de UBE2C) para confirmar la especificidad, particularmente cuando trabaje con muestras donde la expresión de UBE2C es baja o está regulada.

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