Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Ube2N/Ubc13 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61088

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Ube2N/Ubc13

• Ube2N (también conocida como Ubc13) es una enzima conjugadora de ubiquitina E2 que forma heterodímeros funcionales con las subunidades no catalíticas UBE2V1 o UBE2V2.
• Los complejos UBE2V1–UBE2N y UBE2V2–UBE2N catalizan específicamente el ensamblaje de cadenas de poliubiquitina no canónicas unidas por Lys‑63, que no marcan sustratos para degradación proteosomal.
• Desempeña un papel esencial en la tolerancia al daño del ADN libre de errores al mediar la poliubiquitinación unida por Lys‑63 de PCNA, en cooperación con las ligasas E3 HLTF y SHPRH.
• En la inmunidad innata antiviral, el heterodímero UBE2N‑UBE2V1, junto con la ligasa E3 RNF135, cataliza la poliubiquitinación dependiente de ARN viral unida por Lys‑63 de RIG‑I, un paso crítico para la producción posterior de interferón‑beta. Referencias relacionadas: PMID:28469175, PMID:31006531
• La enzima también funciona en la señalización inflamatoria NF‑κB y MAPK; por ejemplo, el dímero UBE2V1‑UBE2N actúa en concierto con TRIM5 para generar cadenas unidas por Lys‑63 que activan el complejo de la quinasa TAK1, mientras que junto con TRAF3IP2 media la poliubiquitinación de TRAF6 aguas abajo de IL‑17A.
• Ube2N se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, consistente con sus funciones duales en la reparación del ADN nuclear y la transducción de señales citoplasmáticas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y formación de enlaces disulfuro; la proteína madura tiene un peso molecular calculado de ~17 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido dentro de los primeros 100 aminoácidos de Ube2N humano; la secuencia del inmunógeno está altamente conservada en ratón y rata, respaldando la reactividad cruzada reportada.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 17 kDa; los lisados celulares completos de líneas celulares humanas, de ratón o de rata son muestras apropiadas.
• En inmunohistoquímica (IHC‑P), puede ser necesario el recuperación de antígeno; valide la tinción en tejidos conocidos por expresar Ube2N y utilice controles apropiados.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), confirme la localización nuclear y citoplasmática; se recomienda optimizar las condiciones de fijación y permeabilización.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede emparejarse con un sistema de detección adecuado; considere usar proteína Ube2N recombinante o el péptido inmunizante como control positivo.

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