Anticuerpo Monoclonal Anti-UBE4B para WB, ELISA - O95155

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de UBE4B

• UBE4B (Factor de Conjugación de Ubiquitina E4 B) es una proteína de múltiples dominios que funciona tanto como una ligasa de ubiquitina E3 como E4 en el sistema ubiquitina-proteasoma.
• Cataliza la transferencia de ubiquitina desde las enzimas E2 a los sustratos y puede ensamblar cadenas de poliubiquitina en diana pre-ubiquitinadas, facilitando la degradación por el proteasoma.
• En el músculo estriado, UBE4B coopera con STUB1 y VCP/p97 para ubiquitinar la chaperona de miosina UNC45B, un paso crítico para la regulación del ensamblaje de la miosina. Referencias relacionadas: PMID:17369820
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, en consonancia con sus funciones en diversos procesos celulares.
• UBE4B se expresa predominantemente en ovario, testículo, corazón y músculo esquelético a nivel de transcripción, y se detecta en miotubos diferenciados a nivel de proteína. La expresión es baja en colon, timo y leucocitos de sangre periférica, y casi indetectable en pulmón y bazo. Referencias relacionadas: PMID:17369820 PMID:11802788
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y acetilación; el empalme alternativo genera múltiples isoformas, que potencialmente modulan su actividad e interacciones.
• El dominio de dedo de zinc tipo RING es esencial para su actividad de ligasa E3, y se ha estudiado la estructura tridimensional de la proteína para comprender los mecanismos de reconocimiento del sustrato.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-100 dentro del extremo N-terminal de la UBE4B humana. Considere verificar la especificidad del anticuerpo mediante western blot usando lisados de tejidos con alta expresión de UBE4B, como corazón o músculo esquelético.
• Para aplicaciones de WB, se espera una banda alrededor de 146 kDa. Debido al gran tamaño de la proteína, asegure condiciones adecuadas de transferencia de proteínas (por ejemplo, tiempo de transferencia suficiente) y use marcadores de peso molecular apropiados.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con la UBE4B de ratón y rata; los experimentos piloto en estas especies deben incluir controles apropiados para confirmar la reactividad y especificidad.
• Los protocolos de ELISA pueden requerir optimización del tampón de recubrimiento y la concentración de anticuerpo; el anticuerpo se puede usar para la detección directa de antígeno o como componente de un par de captura/detección.

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