Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Uubiquitina para WB, IHC-P, ELISA - P0CG47

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Poliubiquitina-B

• La poliubiquitina-B, codificada por el gen UBB, es un precursor de ubiquitina que produce r múltiples unidades de ubiquitina tras su procesamiento.
• La ubiquitina existe unida covalentemente a proteínas objetivo (monoubiquitina o cadenas de poliubiquitina) o libre (sin anclar); las cadenas de poliubiquitina están unidas a través de diferentes residuos Lys (p. ej., Lys-6, Lys-11, Lys-29, Lys-33, Lys-48, Lys-63) o a través del Met iniciador, cada una con funciones celulares distintas.
• Las cadenas de poliubiquitina unidas a Lys-48 dirigen las proteínas a la degradación proteasómica, mientras que las cadenas unidas a Lys-63 median la señalización no degradativa como la endocitosis, la respuesta al daño al ADN y la activación de NF-kappa-B.
• Otros tipos de unión incluyen: Lys-6 (reparación del ADN), Lys-11 (ADAR y regulación del ciclo celular), Lys-29 (respuesta al estrés proteotóxico y ciclo celular), Lys-33 (modificación de quinasas) y cadenas lineales (señalización celular).
• La poliubiquitina libre sin anclar también funciona en la activación de proteínas quinasas y vías de señalización.
• La ubiquitina se localiza predominantemente en el citoplasma y el núcleo, y también se encuentra en la membrana externa mitocondrial.
• Las modificaciones postraduccionales de la ubiquitina incluyen la fosforilación y la ADP-ribosilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó utilizando una proteína de fusión recombinante que cubre la ubiquitina humana de longitud completa (aa 1-228), que incluye todos los residuos clave para el reconocimiento de las formas monoméricas y poliubiquitina.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular predicho es de 26 kDa; sin embargo, debido a la conjugación de la ubiquitina a diversos objetivos, se puede observar una gama de bandas con pesos moleculares más altos, lo que refleja proteínas poliubiquitinadas.
• Al realizar inmunohistoquímica (IHC-P), considere el uso de un método estándar de recuperación de antígenos y valide la especificidad de la tinción con tejidos de control positivos y negativos apropiados.
• La reactividad del anticuerpo con una amplia gama de especies (predicha) sugiere epítopos conservados; verifique la reactividad cruzada en el sistema experimental específico si utiliza especies distintas a humano, ratón o rata.
• Para aplicaciones de ELISA, el inmunógeno recombinante puede servir como control positivo para establecer la sensibilidad y especificidad del ensayo.

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