Anticuerpo Monoclonal Anti-ULK3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6PHR2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ULK3

• ULK3 (Unc-51-like kinase 3) es una proteína quinasa serina/treonina que actúa como regulador clave de la señalización de smoothened en la vía de hedgehog y en la iniciación de la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:19279323 PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• En presencia de ligandos de hedgehog (DHH, IHH, SHH), ULK3 se autofosforila y fosforila a GLI2 (y en menor medida a GLI1 y GLI3), promoviendo su disociación de SUFU, translocación nuclear y activación transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:19878745 PMID:20643644 PMID:31279575

• En ausencia del ligando de hedgehog, ULK3 interactúa con SUFU, lo que inactiva su actividad quinasa y previene la fosforilación de las proteínas GLI, asegurando la represión de la vía. Referencias relacionadas: PMID:20643644

• Más allá de la señalización de hedgehog, ULK3 induce autofagia en respuesta a la senescencia celular, vinculándola con el control de calidad celular y el envejecimiento. Referencias relacionadas: PMID:19279323

• ULK3 se localiza principalmente en el citoplasma y se expresa ampliamente en diversos tejidos, con los niveles más altos en cerebro fetal y en cerebro, hígado y riñón adultos; dentro del sistema nervioso, es particularmente abundante en el hipocampo.

• La proteína contiene dominios quinasa, sitios de unión a ATP y sufre empalme alternativo; se clasifica dentro de la familia de quinasas serina/treonina-proteína y es una fosfoproteína conocida.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 373–472 de ULK3 humano, una región dentro del dominio quinasa. Los investigadores pueden considerar esta ubicación del epítopo al diseñar reactivos de detección complementarios.
• Este anticuerpo ha sido probado en WB, IF/ICC y ELISA. Para inmunotransferencia, la banda esperada es de aproximadamente 53 kDa; las isoformas potenciales derivadas del empalme alternativo pueden aparecer a diferentes tamaños y deben validarse en el sistema de muestra relevante.
• Teniendo en cuenta la reactividad cruzada tanto con humano como con ratón, se recomienda un experimento piloto con controles positivos y negativos apropiados para confirmar la especificidad antes de estudios a gran escala.
• Para aplicaciones de IF/ICC, los métodos de fijación y permeabilización celular deben optimizarse cuidadosamente, ya que ULK3 es una proteína citoplasmática.
• La actividad quinasa y la activación de la vía pueden afectar la expresión de ULK3; por lo tanto, el uso de muestras donde la señalización de hedgehog o la autofagia estén moduladas podría ayudar a evaluar el rendimiento del anticuerpo.

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