Anticuerpo policlonal de conejo anti-USP15 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - Q9Y4E8

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de USP15

• USP15 (Unph-2, Unph4) es una enzima desubiquitinante perteneciente a la familia de las proteasas específicas de ubiquitina.
• Funciona como una hidrolasa que elimina la ubiquitina conjugada de las proteínas diana, regulando vías como la señalización del receptor de TGF-beta, NF-kappa-B y la vía RNF41/PRKN. Referencias relacionadas: PMID:16005295 PMID:17318178 PMID:19576224
• En la señalización de TGF-beta, USP15 desubiquitina los R-SMAD monoubiquitinados (SMAD1/2/3) para promover la activación de genes diana o, alternativamente, estabiliza TGFBR1 mediante desubiquitinación. Referencias relacionadas: PMID:21947082 PMID:22344298
• USP15 desubiquitina la histona H2B, regulando potencialmente la expresión génica y la reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:24526689
• Inhibe la mitofagia al contrarrestar a Parkin y escindir cadenas de poliubiquitina en sustratos mitocondriales como MFN2. Referencias relacionadas: PMID:24852371
• USP15 participa en la organización de los endosomas mediante la desubiquitinación de SQSTM1 y regula negativamente la inmunidad antifúngica mediante la desubiquitinación de CARD9. Referencias relacionadas: PMID:27368102 PMID:33093067
• USP15 se localiza en el citoplasma, el núcleo y las mitocondrias, y se expresa en el músculo esquelético, el riñón, el corazón, la placenta, el hígado, el timo, el pulmón y el ovario.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético, es probable que el anticuerpo reconozca el epítopo especificado. Siempre que sea posible, valide la especificidad en modelos de eliminación o reducción de la expresión génica.
• En la transferencia Western, la proteína USP15 migra aproximadamente a 112 kDa. Utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, Tris-Glicina al 8 %) y asegúrese de realizar una transferencia exhaustiva para proteínas de alto peso molecular. Considere una transferencia húmeda a bajo voltaje durante la noche.
• En la inmunoprecipitación, un anticuerpo policlonal derivado de un péptido sintético puede ofrecer un buen rendimiento. Entrecruce el anticuerpo con perlas de proteína A/G si las cadenas de anticuerpo que se eluyen conjuntamente interfieren con la detección de la diana a aproximadamente 112 kDa.
• Para inmunofluorescencia/ICC, tenga en cuenta la localización nuclear y citoplasmática/mitocondrial dual de USP15. Optimice la permeabilización (por ejemplo, Triton X-100 al 0,1 %) para permitir el acceso del anticuerpo a todos los compartimentos.

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