Anticuerpo policlonal de conejo anti-USP30 para WB, IF/ICC, ELISA - Q70CQ3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de USP30

• USP30 (Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 30, hidrolasa carboxiterminal de ubiquitina 30) es una enzima desubiquitinante también conocida como enzima desubiquitinante 30, tioesterasa de ubiquitina 30 y proteasa específica de ubiquitina 30, codificada por el gen USP30.
• Anclada a la membrana externa mitocondrial, USP30 actúa como un inhibidor clave de la mitofagia contrarrestando la acción de parkina (PRKN); hidroliza la ubiquitina que la parkina une a proteínas diana como RHOT1/MIRO1 y TOMM20, bloqueando así la capacidad de parkina para activar la mitofagia. Referencias relacionadas: PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• Corta de forma preferencial las cadenas de poliubiquitina unidas por Lis-6 y Lis-11, dos tipos de unión involucrados en la señalización de la mitofagia; no corta eficientemente la poliubiquitina fosforilada en Ser-65. Referencias relacionadas: PMID:25621951 PMID:25527291
• Regula negativamente la fusión mitocondrial al mediar la desubiquitinación de MFN1 y MFN2.
• Localización subcelular: membrana externa de la mitocondria; contiene una hélice transmembrana.
• Especificidad tisular: se expresa en músculo esquelético, páncreas, hígado y riñón.
• Pertenece a la familia de peptidasas C19; está clasificado como proteasa de tiol e hidrolasa involucrada en la vía de conjugación de ubiquitina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 57-390 de la USP30 humana, que cubren el núcleo catalítico; tenga en cuenta la conservación de esta región al evaluar la reactividad en ratón y rata.
• Para transferencia Western, se espera una banda alrededor de 59 kDa; valide el tamaño de la banda detectada en su sistema de muestra específico, ya que las modificaciones postraduccionales pueden alterar la migración.
• En inmunofluorescencia/ICC, se debe esperar tinción de la membrana externa mitocondrial; se recomienda la contratinción con un marcador mitocondrial para confirmar la localización.
• Para aplicaciones de ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento y las diluciones del anticuerpo usando una proteína recombinante estándar de USP30 si está disponible.
• Al estudiar la regulación de la mitofagia, considere la manipulación farmacológica o genética concomitante de parkina para evaluar la actividad desubiquitinante de USP30 en su modelo.

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