Anti-USP8 Conejito pAb para WB, IF/ICC, ELISA - P40818

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de USP8

• USP8, también conocida como hidrolasa 8 del extremo carboxilo de la ubiquitina, es una enzima desubiquitinante que elimina la ubiquitina conjugada de las proteínas sustrato, regulando así la estabilidad y el recambio de proteínas.
• Hidroliza tanto las cadenas de poliubiquitina unidas a Lys-48 como a Lys-63, y su actividad catalítica se potencia durante la fase M, vinculándola a la regulación del ciclo celular (Palabras clave: Ciclo celular, Fosfoproteína).
• USP8 juega un papel crítico en la clasificación endosomal y el tráfico de membranas al controlar la dinámica de la ubiquitina en los endosomas tempranos. Desubiquitina EPS15 y mantiene la estabilidad de ESCRT-0, preservando así la morfología del endosoma.
• En la señalización de factores de crecimiento, USP8 elimina la ubiquitina del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), modulando la degradación del receptor y la actividad de la vía MAPK aguas abajo.
• USP8 desubiquitina BACE1, inhibiendo su degradación lisosomal y afectando el procesamiento de la proteína precursora de amiloide (APP) y la formación de amiloide-beta. Referencias relacionadas: PMID:27302062
• Además, USP8 está involucrada en la regulación de la anergia de las células T mediante la formación de complejos con RNF128 y OTUB1, y contribuye a la biogénesis del acrosoma durante la espermatogénesis.
• Subcelularmente, USP8 se localiza en el citoplasma, núcleo, membrana endosomal y membrana celular, lo que refleja sus diversas funciones.
• Las mutaciones en USP8 se asocian con el síndrome de Cushing y otros trastornos, destacando su importancia clínica (Palabras clave: Variante de enfermedad, Síndrome de Cushing).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre la región N-terminal (aa 1-270) de la USP8 humana, que puede reconocer múltiples isoformas debido al empalme alternativo. Verifique la especificidad de la isoforma en su sistema experimental.
• Para Western blot, espere una banda principal alrededor de 128 kDa en condiciones reductoras. Valide el peso molecular observado con controles conocidos y considere usar un gel de bajo porcentaje para una separación óptima de proteínas de alto peso molecular.
• En IF/ICC, USP8 muestra una localización subcelular dinámica. Incluya pasos apropiados de permeabilización y bloqueo; se recomienda la tinción conjunta con marcadores de orgánulos (por ejemplo, EEA1 para endosomas tempranos).
• Para ELISA, este anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección, pero las concentraciones óptimas deben determinarse empíricamente para cada formato de ensayo.
• Este anticuerpo muestra reactividad cruzada confirmada con USP8 de ratón y rata. Al trabajar con modelos de roedores, incluya siempre controles positivos y negativos coincidentes con la especie para confirmar la especificidad.

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