Anticuerpo policlonal de conejo anti-β-catenina para WB, IHC-P, IP y ELISA - P35222

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la β-catenina

• La catenina beta-1 (β-catenina) es una proteína multifuncional codificada por el gen CTNNB1 (CTNNB). Desempeña funciones duales en la adhesión celular y la regulación transcripcional.
• En ausencia del ligando Wnt, la β-catenina es fosforilada por un complejo de destrucción (AXIN, APC, GSK3B, CSNK1A1) y posteriormente ubiquitinada, lo que la dirige a la degradación proteasómica. Tras la estimulación por Wnt, se acumula y se transloca al núcleo para coactivar los factores de transcripción TCF/LEF, impulsando la expresión de genes diana de Wnt. Referencias relacionadas: PMID:17524503, PMID:18077326, PMID:18086858
• Es un componente esencial del complejo de adhesión E-cadherina:catenina en las uniones adherentes, ya que conecta las cadherinas con el citoesqueleto de actina y regula la adhesión entre células.
• La β-catenina circula entre múltiples compartimentos subcelulares, incluidos el citoplasma, el núcleo, las uniones adherentes, la membrana celular, los centrosomas, los polos del huso, las sinapsis y el cuerpo basal del cilio, lo que refleja sus diversas funciones biológicas.
• Las modificaciones postraduccionales, como la fosforilación, la ubiquitinación, la acetilación y la S-nitrosilación, regulan estrechamente su estabilidad, localización y actividad transcripcional.
• Promueve la transición epitelial-mesenquimal (EMT) mediante la activación de la transcripción de genes diana de β-catenina/TCF, un proceso implicado en la metástasis del cáncer. Referencias relacionadas: PMID:29910125
• Participa en la internalización de la insulina a través de la vía CDK2/PTPN6/CTNNB1/CEACAM1 y bloquea la anoikis en células epiteliales malignas mediante la regulación negativa de DAPK2. Referencias relacionadas: PMID:21262353, PMID:18957423
• Altera la formación de los cuerpos nucleares de PML al inhibir la sumoilación de PML mediada por RANBP2, lo que potencialmente contribuye a la oncogénesis. Referencias relacionadas: PMID:22155184
• Se expresa en los folículos pilosos, el colon, las neuronas corticales y los tejidos de cáncer de mama. Referencias relacionadas: PMID:29367600

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 667–781) de la β-catenina humana. Esta región está relativamente conservada entre especies, lo que se correlaciona con la reactividad cruzada notificada del anticuerpo con ratón y rata.
• Para el Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 85 kDa. Optimice empíricamente el bloqueo y las diluciones del anticuerpo, e incluya controles adecuados.
• En la inmunohistoquímica-parafina (IHC-P), los métodos de recuperación antigénica y las condiciones de fijación pueden afectar la tinción. Valide el anticuerpo en cortes de tejido pertinentes y considere el uso de controles positivos y negativos conocidos.
• La naturaleza policlonal del anticuerpo puede proporcionar una detección robusta en diversas aplicaciones, pero debe confirmarse la consistencia entre lotes para los ensayos cuantitativos críticos.
• Al realizar una inmunoprecipitación (IP), la eficacia de la precipitación puede depender de la concentración del anticuerpo, la composición del tampón de lisis y el tiempo de incubación. La conjugación directa del anticuerpo a las perlas puede reducir la interferencia de las cadenas pesadas en el WB posterior.
• Para ELISA, utilice el anticuerpo como reactivo de captura o de detección después de determinar la concentración óptima de emparejamiento y la especificidad.

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