PolimAb® de conejo anti-VCAM1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P19320 / P29533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de VCAM1

• La proteína de adhesión celular vascular 1 (VCAM1), también conocida como CD106 o INCAM-100, es una glicoproteína de adhesión celular codificada por el gen VCAM1 que existe en múltiples isoformas debido al empalme alternativo.
• VCAM1 media principalmente la adherencia de los leucocitos al endotelio a través de interacciones con integrinas, regulando la migración transendotelial durante la vigilancia inmunitaria y la inflamación. Referencias relacionadas: PMID:31310649 PMID:10209034 PMID:22970700
• También actúa como punto de control de calidad en la médula ósea, proporcionando una señal de "no me comas" en la presentación de MHC de clase I para prevenir la fagocitosis. Referencias relacionadas: PMID:35210567
• La proteína se localiza en la membrana celular y puede secretarse en forma soluble, que puede tener funciones diferentes.
• VCAM1 se expresa característicamente en el endotelio vascular inflamado y en células similares a macrófagos y dendríticas tanto en tejidos normales como inflamados.
• La proteína está altamente glicosilada, contiene dominios de inmunoglobulina y enlaces disulfuro, y está sujeta a conjugación similar a ubiquitina, como indican las palabras clave de UniProt.
• La proteína precursora tiene un peso molecular calculado de ~81 kDa; múltiples bandas observadas (38, 71, 74, 81 kDa) en Western blotting pueden reflejar diversidad de isoformas, glicosilación o procesamiento proteolítico.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 640-739 de la VCAM1 humana (UniProt P19320), una región probablemente conservada entre humano, ratón y rata, que soporta la reactividad multiespecie.
• Para Western blotting (WB), las bandas observadas típicas van de 38 kDa a 81 kDa debido a las isoformas y modificaciones; se recomienda usar condiciones reductoras y controles de carga adecuados.
• En inmunofluorescencia (IF-P) e inmunohistoquímica (IHC-P), se espera tinción de VCAM1 en la membrana plasmática y posiblemente en vesículas secretoras; validar con tejido que se sabe que tiene endotelio inflamado.
• El ELISA se puede usar para detectar VCAM1 soluble en suero o sobrenadantes de cultivo; tener en cuenta que el anticuerpo reconoce un epitopo de péptido intracelular, por lo que puede ser necesaria la desnaturalización de la muestra para formatos de captura.

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