Anticuerpo monoclonal de conejo anti-VCP para WB, IF/ICC, ELISA - P55072

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de VCP

• ATPasa del retículo endoplásmico transicional (también designada p97 o VCP) que funciona como una chaperona y segregasa homohexamérica en diversas vías celulares.
• Central para el sistema ubiquitina-proteasoma: el complejo UFD1-VCP-NPLOC4 se une a proteínas mal plegadas ubiquitinadas y las exporta desde el RE para su degradación citosólica.
• Crítico para la dinámica del Golgi: necesario para la fragmentación mitótica y el reensamblaje postmitótico de las pilas del Golgi, y facilita la gemación de vesículas desde el RE transicional.
• Reclutado a roturas de doble cadena de ADN de manera dependiente de RNF8/RNF168, promoviendo la acumulación de TP53BP1 y contribuyendo a la reparación del ADN. (PubMed:22020440, PubMed:22120668) Referencias relacionadas: PMID:22020440 PMID:22120668
• Esencial para la autofagia: necesario para la maduración de autofagosomas que contienen ubiquitina y media la extracción de G3BP1 de los gránulos de estrés para eliminar agregados. (PubMed:20104022, PubMed:27753622, PubMed:38762759, PubMed:29804830, PubMed:34739333) Referencias relacionadas: PMID:20104022 PMID:27753622 PMID:38762759 PMID:29804830 PMID:34739333
• Regula negativamente la producción de interferón tipo I al interactuar con RIGI ubiquitinado, reclutando RNF125 para promover la degradación de RIGI. (PubMed:26471729) Referencias relacionadas: PMID:26471729
• Localización subcelular: Se encuentra en el citoplasma, citosol, retículo endoplásmico, núcleo y gránulos de estrés, consistente con sus roles multifuncionales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-100 de VCP humano (P55072). Se espera que esta región N-terminal genere un anticuerpo que reconozca VCP de longitud completa (~89 kDa) en western blots desnaturalizantes.
• Para WB, utilice condiciones reductoras estándar; el peso molecular predicho es de 89 kDa, pero las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros desplazamientos. Valide la carga con controles apropiados.
• Para IF/ICC, las condiciones de fijación y permeabilización deben optimizarse; se espera que el anticuerpo detecte VCP en sus ubicaciones reportadas (citoplasma, RE, núcleo, gránulos de estrés).
• En ELISA, este anticuerpo puede usarse para la detección sensible de VCP recombinante o nativo; considere emparejarlo con un anticuerpo de detección para ensayos tipo sándwich.
• Se ha demostrado la reactividad cruzada con VCP de ratón y rata, lo que lo hace adecuado para estudios en estas especies; sin embargo, realice una validación específica de especie en su sistema modelo.
• Como con cualquier anticuerpo monoclonal, la consistencia entre lotes es típica, pero siempre realice titulación y validación en su contexto de aplicación específico utilizando controles positivos y negativos.

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