Anticuerpo policlonal de conejo anti-versicano para WB, IF-P, ELISA - P13611

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del versicano

• El versicano es un gran proteoglucano de sulfato de condroitina (también conocido como CSPG2) que media la señalización intercelular, conecta las células con la matriz extracelular y regula la motilidad, el crecimiento y la diferenciación celular.
• Se une al ácido hialurónico con gran afinidad, contribuyendo a la organización y la hidratación de la matriz, e influyendo en procesos como la morfogénesis y la reparación tisular.
• El corte y empalme alternativo produce cuatro isoformas principales (V0, V1, V2, V3) con expresión específica de tejido: V0 y V1 se expresan ampliamente en el cerebro y en diversos tumores, V2 está restringida al cerebro normal y a los gliomas, y V3 está ausente únicamente en los meduloblastomas. Referencias relacionadas: PMID:8627343
• Secretado al espacio extracelular, el versicano se localiza en matrices especializadas como la matriz interfotorreceptora, los segmentos externos de los fotorreceptores y los cilios, lo que subraya sus funciones en la biología sensorial y estructural.
• El versicano se detecta en la placenta (PubMed:32337544), el líquido cefalorraquídeo, los fibroblastos y la orina (PubMed:25326458; PubMed:36213313), la retina (PubMed:29777959) y la sustancia blanca cerebral (PubMed:2469524), lo que refleja su distribución amplia, aunque compartimentada. Referencias relacionadas: PMID:32337544 PMID:25326458 PMID:36213313 PMID:29777959 PMID:2469524
• Entre sus características postraduccionales se incluyen la glucosilación, la fosforilación y los enlaces disulfuro; los motivos de dominio (similares al EGF, de inmunoglobulina, Sushi y lectina tipo C) y la unión al calcio implican al versicano en diversas interacciones moleculares.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1400–1586 dentro del dominio G3 C-terminal; verifique la detección de todas las isoformas relevantes en su sistema experimental mediante el análisis paralelo de estándares recombinantes o controles específicos de isoforma.
• Para el Western blot, utilice geles de poliacrilamida de bajo porcentaje (4–6 %) y una transferencia húmeda prolongada para adaptarse a la proteína de longitud completa de aproximadamente 373 kDa; el tratamiento con condroitinasa ABC puede ayudar a resolver el tamaño de la proteína central al eliminar las cadenas de glucosaminoglucanos.
• En la inmunofluorescencia de muestras incluidas en parafina (IF-P) o de células, optimice la fijación y considere una permeabilización suave para preservar la arquitectura de la matriz extracelular; incluya un control negativo adecuado.
• Al desarrollar ensayos ELISA, combínelo con un anticuerpo de detección compatible y valide el ensayo frente a versicano recombinante o lisados tisulares para confirmar la sensibilidad y la especificidad.

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