Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Vinculina [Validado por KD] para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P18206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la vinculina

• La vinculina es una proteína de unión a filamentos de actina (F-actina) codificada por el gen VCL; una isoforma específica de músculo, la metavinculina (MV), se genera por empalme alternativo.
• Es esencial tanto para la adhesión célula-matriz como para la adhesión célula-célula, regulando la expresión de E-cadherina en la superficie celular y mejorando la mecanosensibilidad del complejo de E-cadherina.
• La vinculina se localiza en múltiples estructuras subcelulares, incluyendo uniones adherentes, adhesiones focales, citoesqueleto, sarcolema, podosomas y el citoplasma perinuclear.
• La proteína sufre procesos de acetilación, fosforilación y palmitoilación, que probablemente modulan su actividad y asociación a la membrana.
• Variantes patogénicas en VCL se asocian a cardiomiopatías; la metavinculina está específicamente implicada en trastornos musculares como la cardiomiopatía dilatada (CMD1W) y la cardiomiopatía hipertrófica (CMH15).
• La vinculina participa en la morfología y la locomoción celular, contribuyendo a la remodelación dinámica del citoesqueleto de actina durante la migración.
• Estudios estructurales indican que la vinculina contiene dominios repetitivos que permiten interacciones con múltiples compañeros de unión, funcionando como andamio molecular en los sitios de adhesión.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1–258 de la vinculina humana (región N-terminal); por lo tanto, el anticuerpo puede detectar la vinculina de longitud completa (~124 kDa) y la isoforma de metavinculina (~150 kDa) en muestras de músculo.
• Para transferencia Western (WB), recomendamos utilizar marcadores de tamaño y controles de carga adecuados; considere usar lisados de líneas celulares humanas, de ratón o de rata que expresen vinculina. La validación por KD confirma la especificidad, pero los usuarios finales deben verificarla en su propio sistema experimental.
• En inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, la vinculina generalmente aparece como puntos distintos en las adhesiones focales y bandas continuas en las uniones célula-célula. Incluya controles negativos (por ejemplo, células con knockdown de vinculina) y co-tinción con marcadores de adhesión para confirmar la localización.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede usar en formatos directos y sándwich; optimice las concentraciones de recubrimiento y las condiciones de detección de forma empírica.

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