Anticuerpo Monoclonal Anti-Vinculina para WB, IF-P, ELISA - P18206

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Vinculina

• La vinculina es una proteína de unión a actina altamente conservada que une las integrinas y las caderinas al citoesqueleto de actina, desempeñando funciones clave tanto en la adhesión célula-matriz como en la adhesión célula-célula.
• Una isoforma específica del músculo, conocida como metavinculina (MV), surge del empalme alternativo y contiene un exón adicional; se expresa predominantemente en el músculo cardíaco y esquelético.
• La vinculina se localiza en las adhesiones focales célula-matriz, las uniones adherentes célula-célula y la región perinuclear, así como en estructuras especializadas como los podosomas y el sarcolema.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y palmitoilación, que regulan su activación, interacciones proteicas y direccionamiento a la membrana.
• La vinculina actúa como mecanosensor; los cambios conformacionales inducidos por tensión exponen sitios de unión crípticos para talina y F-actina, fortaleciendo así los complejos de adhesión.
• Como componente clave del complejo caderina-catenina, la vinculina modula la expresión superficial de E-caderina y potencia el mecanosensado en las uniones adherentes, impactando la morfogénesis y la homeostasis tisular.
• De acuerdo con sus funciones esenciales en la adhesión y la mecanotransducción, las mutaciones en VCL se asocian con la cardiomiopatía dilatada (CMD1W) y la cardiomiopatía hipertrófica (CMH15).
• Además, la vinculina participa en la morfología, migración e invasión celular, como evidencia su reclutamiento a podosomas y su influencia en la dinámica de lamelipodios.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aa800-900) de la Vinculina humana; esta región se conserva entre humanos, ratones y ratas, lo que explica la reactividad cruzada reportada.
• Para Western blotting, la vinculina migra con un peso molecular aparente de ~124 kDa; use porcentajes de gel apropiados (ej., 8% SDS-PAGE) y verifique la eficiencia de transferencia mediante tinción de proteínas totales.
• En inmunofluorescencia (IF-P), considere condiciones de fijación y permeabilización que preserven la arquitectura de las adhesiones focales y las uniones adherentes (ej., 4% PFA seguido de 0.1% Triton X-100). La tinción simultánea con marcadores de paxilina o F-actina puede confirmar la localización.
• Al realizar ELISA, titre el anticuerpo contra el péptido inmunógeno y la proteína nativa para determinar las concentraciones óptimas; la adsorción cruzada puede evaluarse si se observa un fondo alto en matrices complejas.
• Dado que la vinculina es una proteína ubicua, incluir controles de carga apropiados (ej., GAPDH, β-actina) es esencial para análisis cuantitativos.
• Para estudios que involucran tejidos musculares, tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer tanto las isoformas de vinculina como de metavinculina; esta última migra ligeramente más alta, aproximadamente a 150 kDa.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio ofrece una solución integral de un solo paso para materias primas de IVD, conectando a fabricantes de diagnóstico y laboratorios de investigación con más de 200,000 productos. Para investigadores enfocados en la adhesión celular, mecanobiología y trastornos del citoesqueleto, suministramos anticuerpos monoclonales validados, proteínas recombinantes y reactivos auxiliares para acelerar su flujo de trabajo. Aproveche nuestra experiencia en abastecimiento personalizado y suministro a granel para cumplir con los requisitos específicos de su proyecto.