Anticuerpo monoclonal de conejo anti-VPS18 para WB y ELISA - Q9P253

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de VPS18

• VPS18 (homólogo de la proteína 18 asociada a la clasificación de proteínas vacuolares) es una subunidad central de 110 kDa de los complejos VPS-C, esencial para la unión y fusión de membranas en las vías endocítica y autofágica.
• Actúa como componente central de los complejos de anclaje endosomal HOPS y CORVET, que median la fusión de membranas dependiente de SNARE y la conversión de Rab5 a Rab7 durante la maduración de los endosomas (PubMed:11382755, 23351085, 24554770). Referencias relacionadas: PMID:11382755, PMID:23351085, PMID:24554770
• VPS18 es necesaria para la fusión de endosomas y autofagosomas con lisosomas, un paso crítico para la degradación terminal en ambas vías, endocítica y autofágica (PubMed:25783203). Referencias relacionadas: PMID:25783203
• La proteína se localiza en endosomas tardíos, lisosomas, endosomas tempranos, autofagosomas y vesículas recubiertas de clatrina, lo que refleja su amplia función en el tráfico intracelular.
• VPS18 contiene dominios de hélice enrollada y un motivo dedo de zinc, lo que indica funciones en interacciones proteína-proteína y coordinación de metales, y está regulada por modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación.
• Se expresa de forma ubicua, con los niveles más altos en el corazón, lo que sugiere una participación variable según el tejido pero generalizada en el transporte vesicular.
• VPS18 también contribuye al desarrollo de dendritas en las células de Purkinje (por similitud), lo que la implica en el tráfico de membranas neuronales.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, se espera una banda específica cerca de los 110 kDa; optimice las condiciones de SDS-PAGE y la transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-100 de la VPS18 humana; considere utilizar bloqueo con péptido o controles de knockout para confirmar la especificidad.
• En aplicaciones de ELISA, el péptido usado para la inmunización puede servir como control positivo; se recomiendan formatos de ELISA indirecta.
• Valide el anticuerpo en líneas celulares humanas con expresión conocida de VPS18; el enriquecimiento de fracciones endosomales/lisosomales puede mejorar la detección.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo, este reactivo debe ofrecer alta afinidad y rendimiento constante por lote; las diluciones óptimas y los parámetros de incubación deben determinarse empíricamente.

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