Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-WDR4 para WB, IHC-P, ChIP, ELISA - P57081

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

AntContexto Biológico: Función y Localización de WDR4

• WDR4 es el componente no catalítico del complejo metiltransferasa METTL1-WDR4, que cataliza la formación de N(7)-metilguanina en tRNAs, mRNAs y miRNAs (PubMed:12403464, PubMed:31031083, PubMed:31031084). Referencias relacionadas: PMID:12403464 PMID:31031083 PMID:31031084
• Como proteína andamio, WDR4 se une a sustratos de tRNA y dirige a METTL1 para metilar la guanina en la posición 46 (m7G46) en tRNAs con un motivo 5'-RAGGU-3', estabilizando la estructura terciaria del tRNA y protegiendo los tRNAs de la degradación (PubMed:36599982, PubMed:36599985, PubMed:34352206, PubMed:34352207). Referencias relacionadas: PMID:36599982 PMID:36599985 PMID:34352206 PMID:34352207
• WDR4-METTL1 también metila sitios internos en un subconjunto de mRNAs y miRNAs específicos como let-7, influyendo en su procesamiento y estabilidad (PubMed:31031084, PubMed:37379838, PubMed:31031083). Referencias relacionadas: PMID:31031084 PMID:37379838 PMID:31031083
• Más allá de su función de metiltransferasa, WDR4 contribuye a la estabilidad del genoma localizándose en sitios de replicación del ADN y regulando la actividad de endonucleasa de FEN1 (PubMed:26751069). Referencias relacionadas: PMID:26751069
• WDR4 se localiza principalmente en el núcleo y se asocia con los cromosomas, lo cual es consistente con sus roles en la modificación de ARN y la replicación del ADN.
• WDR4 sufre modificaciones postraduccionales incluyendo acetilación y fosforilación, y las variantes asociadas a enfermedades están implicadas en trastornos del desarrollo y neurológicos como la epilepsia y la discapacidad intelectual.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blotting, espere una banda específica a aproximadamente 45kDa. Incluya controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, lisados con sobreexpresión o knockout de WDR4) para confirmar la especificidad.
• Para IHC-P, optimice las condiciones de recuperación de antígenos y valide los patrones de tinción en tejidos conocidos por expresar WDR4. Utilice controles de isotipo para evaluar el fondo.
• En ensayos ChIP, considere que WDR4 se asocia con la cromatina y los sitios de replicación del ADN; diseñe cebadores que se dirijan a regiones genómicas de interés e incluya loci de control negativo.
• Las aplicaciones de ELISA pueden emplear el anticuerpo para detección directa o basada en captura; estandarice las concentraciones de recubrimiento y bloquee la unión inespecífica.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 250–350; por lo tanto, el anticuerpo reconoce un epítopo interno conservado entre WDR4 humano, de ratón y de rata. Verifique la reactividad en su sistema modelo.

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